[发明专利]一种用于盐酸奈必洛尔合成质量控制的检测分析方法

说明书

所属技术领域

本发明涉及化合物合成质量控制检测及药物分析技术领域，具体说是涉及到一种用于盐酸奈必洛尔合成质量控制的检测分析方法。 

背景技术

盐酸奈必洛尔是一种强效、选择性的第三代β受体阻滞剂，可用于治疗轻至中度高血压病的药物，其亦可用于治疗心绞痛和充血性心力衰竭。相较于同类产品比索洛尔、阿替洛尔、普萘洛尔，其具有更高的选择性，且不会引起支气管平滑肌和血管平滑肌收缩，无内源性拟交感活性。可以预见，随着心脑血管药物市场份额的逐年增大，作为第三代高效治疗心脑血管药物的奈必洛尔，其需求也将逐年加大，本品由Johnson&Johnson公司开发，首先于1997年在德国、荷兰上市，后又在意大利、英国、保加利亚、俄罗斯、日本、阿根廷、比利时、卢森堡、泰国等陆续上市。2007年美国FDA批准上市。 

盐酸奈必洛尔的合成方法有多种，其中以杨森公司的申报路线最成熟、最早适于用工业化的路线，其反应式如下： 

在本路线中，以6-氟-色满-2-羧酸(1)为起始原料，经还原反应成醇，再经氧化反应成醛，醛再经环氧化反应成相应的环氧化物(2)和(2')，再与苄胺反应生成N-苄基奈必洛尔(4)，最后 通过脱苄基及盐酸化得到最终产物盐酸奈必洛尔。在本路线中起始原料与关键中间体(2及2'，3，4)需要进行质量控制；最终产物盐酸奈必洛尔为(S,R,R,R)与(R,S,S,S)的外消旋混合物，也需要对其进行有关物质、异构体杂质及含量的测定。目前关于奈必洛尔质量控制的高效液相色谱(HPLC)分析方法不仅还未收入美国药典(USP)及欧盟药典(EP)，而且在国内外文献及专利的调研中也未见对盐酸奈必洛尔合成中的关键中间体进行质量控制的方法，特别是对盐酸奈必洛尔中的有关物质进行检测的HPLC方法非常重要，但是目前为止还未见报道。而全面系统地从起始原料到最终产物中及其合成中的关键中间体进行质量控制，对于盐酸奈必洛尔的质量研究及合成工艺控制具有相当重要的指导意义，也是本领域当前面临的重要任务。 

发明内容

本发明的目的是建立一种用于盐酸奈必洛尔合成质量控制的检测分析方法，方法具有分离度好、简单快速、专属性强、灵敏度高，能够对盐酸奈必洛尔合成过程中的原料、关键中间体和终产品进行质量控制，保证整个合成过程的可控性。 

为了达到上述目的，本发明采用高效液相色谱法(HPLC)：一种用于盐酸奈必洛尔合成质量控制的检测分析方法，包括了起始原料1(6-氟-色满-2-羧酸)的纯度检测、中间体2，2'(环氧化物)化学纯度检测、中间体2，2'(环氧化物)异构体杂质检测、中间体3(N-苄基氨基醇)纯度检测、中间体4(N-苄基奈必洛尔)纯度检测、盐酸奈必洛尔含量检测、盐酸奈必洛尔中起始原料1、中间体2，2'、中间体3含量检测、盐酸奈必洛尔中中间体4含量检测及盐酸奈必洛尔异构体检测共九个检测步骤，具体步骤如下： 

步骤一.高效液相色谱法测定起始原料1的产品纯度 

选用十八烷基键合硅胶色谱柱，含0.4～0.6%三乙胺水与0.4～0.6%三乙胺甲醇为流动相，检测波长选用260～290nm，洗脱条件为水相比有机相为50:50～70:30，洗脱流速为0.5～1.0mL/min。6-氟-色满-2-羧酸的纯度采用面积归一化法确定。 

在本发明的具体实施方案中，所述十八烷基键合硅胶柱的颗粒度为3～5μm，优选5μm.；水相-有机相为含0.5%三乙胺水-含0.5%三乙胺甲醇；检测波长选择280nm；水相-有机相的比例为63:37；流速为1mL/min。 

步骤二.高效液相色谱法测定中间体2，2'的产品纯度 

选用十八烷基键合硅胶色谱柱，水与甲醇作流动相，检测波长选用260～290nm，洗脱条件为水比甲醇为30:70～50:50，洗脱速度为0.5～1.0mL/min。中间体2，2'的纯度采用面积归一化 法确定。 

在本发明的具体实施方案中，所述十八烷基键合硅胶柱的颗粒度为3～5μm，优选5μm.；检测波长选择280nm；水相-有机相的比例为40:60；流速为1mL/min。 

步骤三.高效液相色谱法测定中间体2，2'中异构体杂质的含量 

选用硅胶表面涂敷有直链淀粉－三(3,5－二甲苯基氨基甲酸酯)大赛璐高效手性正向分离柱，检测波长选择260～290nm，洗脱流动相为甲醇，洗脱速度为0.7～1.0mL/min；中间体2，2'中异构体杂质的含量采用面积归一化法确定。