[发明专利]一种能够在哺乳动物肌肉组织中特异启动基因表达的启动子序列及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种能够在哺乳动物肌肉组织中特异启动基因表达的启动子序列及其应用，属于基因工程技术领域。

背景技术

MRF4(myogenic regulatory factors4)是生肌决定因子MRF(myogenic regulatory factors)家族的一员，此基因家族在胚胎发育过程中调控肌肉细胞的增殖和分化，与动物肌肉中肌纤维的数量和粗细有密切关系。MRF4在分化的肌管中表达，调控着成肌细胞的分化和肌管的融合。在心肌，平滑肌和面部肌肉中不表达，只在分化的骨骼肌中有表达。MRF4具有高度保守的螺旋-环-螺旋(bHLH)碱性区，是一个骨骼肌特异性的转录调节因子，bHLH区是执行调控的重要区域，bHLH区可以与普遍存在的蛋白E12和E47形成异源二聚体，此二聚体可以与靶基因启动子序列的E-box位点结合，调节靶基因的转录。

在小鼠胚胎发育过程中，在妊娠9天的胚胎中(E9)MRF4瞬时开始表达，启动Myf5表达后MRF4的表达逐渐减少直到消失，胚胎发生的第16天(E16)时，胎儿体内分化的肌纤维中MRF4再次表达，直至出生后还一直维持在较高的水平，这就说明MRF4的功能可能是维持肌肉细胞分化的状态。而且在敲除MRF4基因的情况下，胚胎可以正常发育，所以MRF4并不是肌肉分化所必需的，但是在分化的肌肉中能够特异性的表达。肌肉组织特异性启动子，在这类启动子的驱动下，通过构建相应的表达载体，基因的表达只限于肌肉组织，在基因工程中越来越获得研究者的青睐。通过外源基因在动物骨骼肌中的特异性表达可很好的研究肌肉的分化或基因的功能及改善肌肉的风味与质量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够在哺乳动物肌肉组织中特异启动基因表达的启动子序列及其应用，以便更好地表达哺乳动物的基因，便于研究改善哺乳动物肌肉的分化及改善。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下。

一种能够在哺乳动物肌肉组织中特异启动基因表达的启动子序列，所述序列包含SEQ ID NO.1的核苷酸序列或者与其互补的核苷酸序列。

进一步地，所述肌肉组织特异启动子序列还包括酶切位点，所述的酶切位点位于SEQ ID NO.1的核苷酸序列或者与其互补的核苷酸序列的两端，所述的酶切位点分别是xho1和hind III。

进一步地，所述序列涉及含有上述肌肉特异启动子序列的表达载体。

进一步地，所述序列涉及上述载体在制备转基因哺乳动物或转染哺乳动物细胞中的应用。

进一步地，所述载体用于小鼠哺乳动物或哺乳动物细胞中特异性的启动基因在肌肉及分化的肌管中表达。

该发明的有益效果在于：该发明技术涉及肌肉组织特异性启动子，在这类启动子的驱动下，通过构建相应的表达载体，基因的表达只限于肌肉组织，在基因工程中起到较好的作用。通过外源基因在动物骨骼肌中的特异性表达可很好的研究肌肉的分化或基因的功能及改善肌肉的风味与质量。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明的具体实施方式进行描述，以便更好的理解本发明。

实施例

一种能够在哺乳动物肌肉组织中特异启动基因表达的启动子序列及其应用，序列具体如下：