[发明专利]一种铁皮石斛的杂交授粉方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种珍稀药用植物的杂交繁殖方法，具体是一种铁皮石斛的杂交授粉方法。

背景技术

铁皮石斛（Demdrobium of ficinale）为兰科石斛属多年生草本植物，是我国传统名贵珍稀中药材，具有养胃生津、滋阴清热、提高人体免疫力等功效。目前，铁皮石斛已被列为国家重点保护药用植物、世界二类保护植物。

铁皮石斛花因其特殊的生理结构使得自然条件下铁皮石斛的结果率极低，铁皮石斛一般5月为盛花期，花期10~15d，其果实为蒴果，成熟时容易裂开，种子随风飘荡散落，这些细小的种子的种皮内只含未成熟的胚，不含胚乳，自然繁殖十分困难。随着现代植物组培技术的发展，人们通过组培技术来进行石斛种胚的萌发繁育已经变的相当成熟。石斛种胚的获得已经成为铁皮石斛产业化发展的因素之一，目前石斛种胚的获得主要通过传统人工授粉而得到，传统人工授粉方法具有操作技术要求高、场地性要求苛刻、劳动强度大、生产效率低、坐果率低下和空果率高等缺点。如2009年9月23日公开的申请号为200910010107.3的中国发明专利申请《铁皮石斛杂交授粉方法》，提供了一种石斛杂交技术，但是它在授粉过程中需要人工用镊子将父本的花粉粒送至母本的柱头窝内，操作时容易对柱头造成物理损伤，且采用此法坐果率最高不超过80.6%。因此简单高效的铁皮石斛杂交授粉方法还有待进一步的研发。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种简捷高效、可操作性强的铁皮石斛的杂交授粉方法，可大大提高铁皮石斛授粉的效率。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种铁皮石斛的杂交授粉方法，其特征在于包括以下步骤：

1）花粉的收集：剪取花期在4~7d的铁皮石斛花，分别收集花粉粒和铁皮石斛花；

2）铁皮石斛花汁的制备：将上述收集的铁皮石斛花清洗晾干后制取铁皮石斛花汁；

3）花粉悬浊液的制备：将步骤1）收集的花粉粒加入到步骤2）制取的铁皮石斛花汁中后，利用超声均质制得铁皮石斛花粉粒团悬浊液；

4）授粉：使用胶头滴管将铁皮石斛花粉粒团悬浊液对盛开4~7d的铁皮石斛花进行授粉，每朵铁皮石斛花柱头确保滴入2~4个铁皮石斛花粉粒团；

5）坐果后期管理。

作为改进，所述步骤1）的花粉的收集的具体过程为：剪取花期在4~7d的铁皮石斛花，均匀分散至洁净白瓷盘中，于25~28℃、180~230r/min在摇床中处理30~60min后，分别收集白瓷盘中的花粉粒和铁皮石斛花。

作为改进，所述步骤2）的铁皮石斛花汁的制备的具体过程为：将清洗晾干后的铁皮石斛花放入沙冰机中搅拌2~3min，然后通过120~160目的筛网获取滤液后，在滤液中加入滤液体积0.5~1.5倍的去离子水得到铁皮石斛花汁。

再改进，所述步骤5）的坐果后期管理为：坐果10~15d后统计坐果率，坐果15~20d进行疏果以确保蒴果生长所需的正常养分，后期管理按正常方式进行管理。120d即可获得成熟的石斛蒴果。

优选，所述步骤3）中超声均质中超声波频率为10~40KHz，超声波功率为100~400W，超声处理时间为30~45秒，以1L物料为基准。

最后，所述步骤3）中超声均质采用超声波均质仪、超声波振荡仪或者超声波清洗仪。

与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明将花粉粒与铁皮石斛花汁超声均质后得到铁皮石斛花粉粒团悬浊液，使用胶头滴管将铁皮石斛花粉粒团悬浊液对铁皮石斛花进行授粉，避免了对母本的柱头的损伤，且坐果率高（98.2%以上）、无空果存在，坐果120d即可获得成熟的石斛蒴果，果实均匀饱满。本发明具有简捷高效、可操作性强的特点，授粉效率为传统授粉方法的5~10倍，大大提高了铁皮石斛授粉的效率，应用价值极高，为铁皮石斛的人工授粉开辟了一条高速有效的新途径。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。