[发明专利]一种电致化学发光成像装置及其应用

权利要求书

1.一种电致化学发光成像装置，其特征在于，包括物镜、光传输通道、单光子检测电子倍增CCD和电致化学发光发生器，所述电致化学发光发生器包括ITO电极、银电极和电压发生器，其中，所述物镜、光传输通道和单光子检测电子倍增CCD依次连接；所述ITO电极与电压发生器的正极相连，银电极和电压发生器的负极相连。

2.权利要求1所述的电致化学发光成像装置在可视化检测双氧水中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：将发光试剂和双氧水加入到O型圈内，在单光子检测电子倍增CCD曝光的同时向ITO电极施加周期性的发光电压-恢复电压，检测成像效果。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的发光试剂为LO12、鲁米诺、N-(4-氨基丁基)-N-乙基异鲁米诺，N-(6-氨基已基)-N-乙基异鲁米诺和异硫氰酸异鲁米诺中的任意一种，用量为100μM～500μM。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述双氧水的检测范围为10～200μM。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，单光子检测电子倍增CCD曝光的时间为两个发光电压-恢复电压周期，其中，一个发光电压-恢复电压周期为：发光电压：1.0±0.1V的正电压下2±1s；恢复电压：-1.0±0.1V的负电压下0.5±0.25s。

7.权利要求1所述的装置在可视化检测单细胞表面外泄双氧水中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：在ITO玻璃片的表面粘贴O型圈作为溶液室，以ITO玻璃片为工作电极，银电极为对电极，将细胞在溶液室中培养，向溶液室中加入发光试剂，然后加入PMA刺激细胞内的NADPA氧化酶使细胞表面产生双氧水，在单光子检测电子倍增CCD曝光的同时向ITO电极施加周期性的发光电压-恢复电压，检测成像效果。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述的发光试剂为L012、鲁米诺、N-(4-氨基丁基)-N-乙基异鲁米诺，N-(6-氨基已基)-N-乙基异鲁米诺和异硫氰酸异鲁米诺中的任意一种，用量为100μM～500μM。

10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，单光子检测电子倍增CCD曝光的时间为两个发光电压-恢复电压周期，其中，一个发光电压-恢复电压周期为：发光电压：1.0±0.1V的正电压下2±1s；恢复电压：-1.0±0.1V的负电压下0.5±0.25s。

11.权利要求1所述的装置在可视化检测细胞表面分子上的应用。

12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于，包括如下步骤：在ITO玻璃片的表面粘贴O型圈作为溶液室，以ITO玻璃片为工作电极，银电极为对电极，将细胞在溶液室中培养，向溶液室中加入发光试剂，利用细胞表面的待测分子对应的氧化酶将所述待测分子转化为双氧水，在单光子检测电子倍增CCD曝光的同时向ITO电极施加周期性的发光电压-恢复电压，检测成像效果。

13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述的发光试剂为L012、鲁米诺、N-(4-氨基丁基)-N-乙基异鲁米诺，N-(6-氨基已基)-N-乙基异鲁米诺和异硫氰酸异鲁米诺中的任意一种，用量为100μM～500μM。

14.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，单光子检测电子倍增CCD曝光的时间为两个发光电压-恢复电压周期，其中，一个发光电压-恢复电压周期为：发光电压：1.0±0.1V的正电压下2±1s；恢复电压：-1.0±0.1V的负电压下0.5±0.25s。