[发明专利]一种艾滋病抗原检测芯片制备方法在审
申请号: | 201410127560.3 | 申请日: | 2014-04-01 |
公开(公告)号: | CN104977413A | 公开(公告)日: | 2015-10-14 |
发明(设计)人: | 戴天岩 | 申请(专利权)人: | 虫洞(北京)卫生科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100024 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 艾滋病 抗原 检测 芯片 制备 方法 | ||
1.一种艾滋病抗原检测芯片制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一,合成新型核壳型二氧化硅荧光纳米粒子;
步骤二,标记链亲和素;
步骤三,制备基于检测HIV p24抗原检测的蛋白质芯片。
2.根据权利要求1所述的一种艾滋病抗原检测芯片制备方法,其特征在于:根据步骤一,合成原料包括表面活性剂、助表面活性剂、环己烷和硝酸银水溶液,将合成原料混合成微乳液,加入还原剂,将Ag+还原为单质Ag,然后加入正硅酸乙酯与氨水使发生聚合反应,在纳米银表面就包覆一层SiO2,加入带有螯合基团配位体的试剂,反应后分离出纳米粒子,再将该纳米粒子分散到Eu3+或Eu3+与Tb3+水溶液中充分反应,将纳米粒子离心、洗涤、干燥即得到最终所需要的纳米粒子。
3.根据权利要求2或所述的一种艾滋病抗原检测芯片制备方法,其特征在于:所述纳米粒子中核为Ag核,壳为SiO2,发光来源于稀土配合物,Ag核对稀土配合物发光具有金属增强荧光效应。
4.根据权利要求1或所述的一种艾滋病抗原检测芯片制备方法,其特征在于:根据步骤二,采用戊二醛交联法标记链亲和素。
5.根据权利要求4或所述的一种艾滋病抗原检测芯片制备方法,其特征在于:根据步骤三,所述芯片拟采用醛基或巯基修饰的玻片做片基,采用夹心法引入生物素链亲和素放大系统,对p24抗原的分析拟采用两株配对的抗p24单克隆抗体,或一种为单抗,另一种为多抗,其中一株抗体通过点样固定在玻片上制成固相抗体,另一株抗体标记生物素,在分析buffer中加入一种解离剂如甘氨酸与Tris-HCl混和试剂,以使血清中的p24从抗原-抗体复合物中解离出来,首先通过夹心法使待分析的p24抗原与芯片上的固定抗体及加入的与该抗体配对 的标记生物素的另一株单克抗体反应,然后加入标记链亲和素的荧光纳米粒子,利用生物素-链亲和素高亲和反应,使荧光纳米粒子固定到反应复合物上,反应完成后将芯片置于芯片扫描仪上扫描,测量荧光信号,获取数据并进行数据处理与分析。
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