[发明专利]一种嗜热碱性重组含锰过氧化氢酶及其毕赤酵母表达载体和工程菌有效
| 申请号： | 201410128235.9 | 申请日： | 2014-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN103882038A | 公开（公告）日： | 2014-06-25 |
| 发明（设计）人： | 赵志军;史吉平;姜标;孙俊孙;何晓娟 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海高等研究院 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N9/08;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 上海光华专利事务所 31219 | 代理人： | 张艳 |
| 地址： | 201210 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 碱性 重组 过氧化氢酶 及其 酵母 表达 载体 工程 | ||
1.一种重组含锰过氧化氢酶的多核苷酸，其序列如SEQ ID No：1所示。
2.一种重组含锰过氧化氢酶，由权利要求1所述的多核苷酸序列编码。
3.一种重组含锰过氧化氢酶表达载体，包含如权利要求1所述的重组含锰过氧化氢酶的多核苷酸序列。
4.如权利要求3所述的重组含锰过氧化氢酶表达载体，其特征在于，所述表达载体为pPIC系列表达载体。
5.如权利要求4所述的重组含锰过氧化氢酶表达载体，其特征在于，所述pPIC系列表达载体为pPIC3.5K。
6.一种工程菌，所述工程菌由权利要求3-5任一权利要求所述的重组含锰过氧化氢酶表达载体转化获得。
7.如权利要求6所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌由权利要求3-5任一权利要求所述的重组含锰过氧化氢酶表达载体转化毕赤酵母获得。
8.如权利要求7所述的工程菌，其特征在于，所述毕赤酵母为毕赤酵母KM71。
9.一种重组含锰过氧化氢酶的制备方法，包括如下步骤：将权利要求6-8任一权利要求所述的工程菌在种子培养基中活化后，转接至发酵培养基中培养，当菌浓OD600达到100-120时，添加MnCl2和甲醇，并进行诱导培养。
10.如权利要求9所述的一种重组含锰过氧化氢酶的制备方法，其特征在于，所述种子培养基为YPD培养基。
11.如权利要求9所述的一种重组含锰过氧化氢酶的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基为BMGY培养基或BSM培养基。
12.如权利要求9所述的一种重组含锰过氧化氢酶的制备方法，其特征在于，所述诱导培养的具体条件为：在30℃流加甲醇诱导72-120h。
13.如权利要求9所述的一种重组含锰过氧化氢酶的制备方法，其特征在于，所得诱导培养培养液的菌体破碎上清液依次通过常规蛋白纯化方法中的疏水层析、阴离子交换和凝胶过滤进行蛋白纯化，即得所述重组含锰过氧化氢酶。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院上海高等研究院，未经中国科学院上海高等研究院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201410128235.9/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：数控装置操作面板
- 下一篇：一种电法勘探发电机远程监控电路
