[发明专利]一种密花核果木茎提取物的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然植物有效成分的提取分离技术领域，涉及一种密花核果木茎提取物的制备方法。

背景技术

大戟科（Euphorbiaceae）核果木属（Drypetes）植物全世界约200种，分布于亚洲、美洲和非洲中西部等热带、亚热带地区。该属植物在非洲民间为传统药材，主要用于治疗淋病、恶性肿瘤、黑热病、类风湿、支气管炎等症，药用史由来已久。核果木属植物作为恶性肿瘤的传统治疗药物，对其开展抗肿瘤活性研究具有极大的开发潜力。

中药的抗肿瘤作用得到广泛关注。许多临床及实验证实，很多中药的作用明显，且毒副作用小。而紫杉醇、喜树碱、长春碱及长春新碱等的研发成功进一步佐证了天然产物作为抗肿瘤药物研究战略的可行性。因此，从中药中寻找高效低毒的抗肿瘤药物已成为该类药物研究的一个重要方向。

虽然核果木属植物作为恶性肿瘤的传统治疗药物由来已久，但目前国内外尚未对该属植物进行抗肿瘤方面的相关研究。密花核果木（Drypetes congestiflora）分布于海南、广东、云南等省的山地疏林中，是一新拟种，为海南主要经济林木，国内外未见其化学成分和药理活性的研究报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足而提供一种密花核果木茎提取物的制备方法，利用简单的提取分离方法对密花核果木茎不同极性部位进行抗肿瘤活性筛选，找到活性部位，经多次柱层析，阐明活性部位的化学成分。

一种密花核果木茎提取物的制备方法，其步骤如下：

1、在密花核果木茎的干燥粉末中加入溶剂提取，溶剂为85～95%的乙醇或甲醇。

2、将密花核果木茎提取液经过滤、减压浓缩得到总提取物，加水混悬，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，减压回收分别得到石油醚部分、氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分。

3、石油醚部分经反复柱层析，得到3个三萜类化合物、7个甾醇类化合物和1个甘油酯衍生物。

上述方法中，所述密花核果木茎干燥粉末是将密花核果木的茎经阴干后粉碎得到。

上述方法中，所述提取方法包括室温浸泡、加热或超声提取。

上述方法中，密花核果木茎药材与溶剂的体积比为1：1～1：10。

上述方法中，柱层析用填料为柱层析用硅胶或葡聚糖凝胶。

上述方法中，3个三萜类化合物、7个甾醇类化合物和1个甘油酯衍生物，分别为β-香树酯、3α-羟基齐墩果酸、木栓酮、麦角甾-6,22-二烯-3β,5α,8α-三醇、豆甾醇-7-酮、7β-羟基豆甾醇、7α-羟基豆甾醇、6β-羟基-豆甾-3-酮、豆甾-4-烯-3,6-二酮、β-谷甾醇和正十六碳酸α-甘油酯。

本发明的提取物具有抗肿瘤活性，可以广泛应用于预防和治疗肿瘤药物中。

本发明的优点在于：

1）利用简单的提取分离方法，对密花核果木茎不同极性部位进行抗肿瘤活性筛选，找到活性部位，经多次柱层析，阐明活性部位的化学成分。

2）本发明所得提取物的化学成分明确。

3）所得提取物具有很好抗肿瘤活性，可以广泛用于预防和治疗肿瘤药物中。

4）本法明制得的提取物得率高，工艺流程简单，成本低廉，适合较大规模的制备。

具体实施方式

下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,或按照制造厂商所建议的条件。

密花核果木茎提取物的制备方法步骤如下：

1）将粉碎后的密花核果木茎药材（过20-80目筛）中加入85-95%的乙醇或甲醇，室温浸泡、加热或超声提取，提取时间为60分钟至7天，料液比为1：1～1：10；

2）将密花核果木茎药材提取液过滤、减压回收得到总提取物，加水混悬，加水混悬，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，减压回收分别得到石油醚部分、氯仿部分、乙酸乙酯部分和正丁醇部分；