[发明专利]肿瘤靶向多肽‑阿霉素衍生物及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物与医药技术领域，具体涉及一种具有抗癌活性的多肽—阿霉素衍生物及其制备方法和应用。 

背景技术

阿霉素（DOX）属蒽环类化合物，是最有效的抗癌药物之一，在临床上被广泛用于治疗急性白血病、乳腺癌、淋巴瘤以及各种实体瘤。但与其它抗癌药物一样，由于其易产生耐药性，选择性差，阿霉素的临床应用受到严重的限制。在近20年中，人们针对阿霉素进行了大量的结构改造和修饰，以期增强肿瘤靶向性，提高疗效。 

抗癌药物的耐药性和低选择性，可以通过以各种多肽或蛋白作为携带载体，利用载体所具有的受体介导的内吞机制，增加其对癌细胞直接的靶向性来获得改善。上述结合物的选择性既可以通过癌细胞膜上存在的可以被特异性片段识别的受体，也可由癌细胞膜上具有比正常细胞更高水平的受体来获得。文献报道，转铁蛋白受体在肿瘤细胞表面的表达水平远高于正常细胞，因此，我们选择转铁蛋白受体为我们特征性的受体。目前，转铁蛋白受体的配体，转铁蛋白作为头基广泛用于构建肿瘤靶向给药系统。但是机体的内源性转铁蛋白浓度高，竞争抑制转铁蛋白修饰的给药系统的靶向转运。近年通过噬菌体展示技术筛选出的T7肽（HAIYPRH）和T12肽（THRPPMWSPVWP），可靶向结合转铁蛋白受体，且对转铁蛋白受体的亲和性和转铁蛋白相当。而二者在转铁蛋白受体上的结合位点与转铁蛋白不同，不会与内源性的转铁蛋白产生竞争抑制，且不影响转铁蛋白本身的生理功能，相反转铁蛋白与受体的结合会促进T7肽和T12肽的入胞效率。同时，它们都是小分子多肽，具有可化学合成、稳定性好的优点，作为靶向头基空间位阻小，临床应用前景好。 

经结构修饰的药物到达肿瘤部位后，能否以活性形式有效释放出来，关系到药物能否进入靶向部位发挥药效，是药物设计的又一关键问题。肿瘤细胞的旺盛生长伴随着大量酸性代谢产物的形成和外排，从而形成肿瘤酸性微环境。研究发现，腙键在酸性条件下选择性断开，而在正常生理环境中保持稳定。近年来，阿霉素的腙衍生物，例如（6-马来酰亚胺基己酰基）腙衍生物（DOXO-EMCH），作为共价键连接体，构建靶向给药系统，引起了广泛的关注。 

发明内容

解决的技术问题： 

本发明的目的是提供一种肿瘤靶向多肽—阿霉素衍生物及其制备方法和应用。 

技术方案： 

肿瘤靶向多肽—阿霉素衍生物，结构通式如式I所示： 

其中R为T10肽：HAIYPRHGGC或T15肽：THRPPMWSPVWPGGC。 

上述肿瘤靶向多肽—阿霉素衍生物的制备方法，包括以下步骤：步骤1，将多肽溶于pH值7.8～8.2的磷酸盐缓冲液里，再将阿霉素前体药物（6-马来酰亚胺基己酰基）腙衍生物（DOXO-EMCH）溶于溶剂中得到溶液，所述多肽为T10肽或T15肽，所述溶剂为水与N，N’—二甲基甲酰胺的混合物，将DOXO-EMCH溶液滴加入到多肽溶液中，室温下避光搅拌反应，再将溶液离心去除沉淀，即可制得粗产物；步骤2，采用制备色谱法对粗产物进行分离纯化，离心浓缩，制得精制品T10-DOXO-EMCH或T15-DOXO-EMCH。 

所述步骤1中，DOXO-EMCH溶于的溶剂为水与N，N’—二甲基甲酰胺的1:1体积比混合物。 

所述步骤1中，DOXO-EMCH与多肽摩尔比为2:1。 

所述步骤1中，DOXO-EMCH滴加入到多肽溶液中的速率为25μL/min。 

所述步骤1中，避光室温搅拌时间为1.5h。 

所述步骤2中，制备色谱法的色谱条件为：制备柱SanFire Prep C18OBD柱：18mm×150mm，10μm；流动相A为甲酸水溶液，其中甲酸体积百分比浓度为0.01%，流动相B为100%乙腈；梯度洗脱分离目标产物。T10‐DOXO‐EMCH的洗脱程序是：0～5min，5～20%B，5～15min，20%～50%B，15～20min，50%～80%B，20～25min，80%～20%B，25～30min，20%～5%B，T15‐DOXO‐EMCH的洗脱程序是：0～5min，10%～20%B，5～15min，20%～20%B，15～20min，20%～50%B，20～25min，50%～90%B，25～30min，90%～10%B。 

上述肿瘤靶向多肽—阿霉素衍生物在制备抗肿瘤药物中的应用。 

抗肿瘤药物，有效成分为权利要求1式I所示的肿瘤靶向多肽—阿霉素衍生物。 

上述肿瘤靶向多肽—阿霉素衍生物在抗肿瘤中的应用。 

有益效果：