[发明专利]一种组织细胞标本石蜡包埋的制作方法

说明书

技术领域

本发明属于临床病理诊断、科研领域中对细胞学检测方法，具体说一种组织细胞标本石蜡包埋的制作方法。

背景技术

通过胸、腹水及淋巴液检测肿瘤细胞是临床病理诊断常用的检测方法之一，目前采用较多的方法有涂片法、TCT、LCT等，其制作的细胞涂片分布均匀，形态清晰，阳性诊断率较高，但由于负载的肿瘤细胞少，可出现细胞成团、重叠、挤压等现象，同时也不能满足后期的免疫组化的鉴别诊断。经细胞蜡块制作的切片细胞数量多，可连续切片，并可满足免疫组化、分子病理检测，满足了临床病理的需求。但常规制作时间需要3～5天，加上免疫组化时间往往需要5～7天才能拿到诊断报告。且在制作过程中因甲醛、二甲苯的挥发对人体产生一定的毒害。因此，目前的制作方法亟待改进。

如何提供一种组织细胞标本石蜡包埋的制作方法，具有制作时间短，操作简便，步骤少，结果稳定，阳性检出率及准确率高，并减少污染环境。这是本发明面临的技术问题。

发明内容

本发明为解决现有技术存在的上述问题，提供一种组织细胞标本石蜡包埋的制作方法，具有制作时间短，操作简便，步骤少，不易出差错，结果稳定，阳性检出率及准确率高，并减少环境污染。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：一种组织细胞标本石蜡包埋的制作方法，其特征在于，制作方法包括将组织细胞标本经沉淀、离心处理后，提取组织细胞标本并加入一种环保型生物合成剂，经超声波组织处理仪或医用微波炉对组织细胞标本同步进行固定、脱水、透明、浸蜡处理，石蜡包埋组织切片、染色及封片。

对上述技术方案的一种改进：所述的组织细胞标本为胸腔积液或腹腔积液，所述提取组织细胞标本的具体步骤如下：

（1）沉淀组织细胞：将抽取的胸腔积液或腹腔积液100～500ml放入干净的器皿中，静止1-2小时，使大量的胸腔积液或腹腔积液中的组织细胞自然沉降到器皿的底部；

（2）采集组织细胞：弃去上清液，将底层的沉淀50～100ml置于多个容积为5ml的试管中离心，离心转速为2000～2500转/分，离心时间为5-10分钟，将上清液弃去，最后将所述多个试管内的组织细胞集中至一个试管中，直到获得较多的组织细胞数量；

（3）凝固组织细胞：在最后沉淀组织细胞中加入10%中性缓冲甲醛，并用吸管将沉淀的组织细胞打散，再离心1-3分钟，至少静置15分钟后将半凝固状成团的组织细胞放入纱布中包好，放入包埋盒中。

对上述技术方案的进一步改进：对于离心后组织细胞数量少的标本：

   （1）所述采集组织细胞步骤中，所述多个试管内的组织细胞集中至一个试管的形状为锥形的试管，使用锥形试管再次离心1-3分钟后，弃去上清液，加入少量的蛋白甘油，与组织细胞混合，使较少的组织细胞与蛋白相溶；

   （2）所述包埋包括初次包埋和二次包埋，所述初次包埋是向组织细胞中加入无水酒精，1-3分钟后取出半凝固状的组织细胞放入纱布中包好，放入包埋盒中；无水酒精与蛋白凝固将组织细胞包裹在内，起支撑固定作用。

 对上述技术方案的另一种改进：所述的组织细胞标本为尿液、淋巴液或细胞悬液，具体步骤如下：

   （1）离心采集组织细胞：先将大量的尿液、淋巴液或细胞悬液中的一种，用大型离心机分多次离心，弃去上清液，最后将沉淀物集中到一个试管内离心，弃去上清液；淋巴液和细胞悬液因标本总量较少，但细胞含量大，可直接放入试管中离心后弃去上清液； 

（2）所述包埋包括初次包埋和二次包埋，所述初次包埋是向所述尿液、淋巴液或细胞悬液中的一种组织细胞内加入熔点为45℃-52℃的5%琼脂或5%蛋白，室温下快速凝聚成团状，放入纱布中包好放入包埋盒中，起支撑作用；或者，所述初次包埋是向所述尿液、淋巴液或细胞悬液中的一种组织细胞内加5%蛋清，用吸管打散后加入10%的中性缓冲甲醛，至少静置15分钟后，将已凝固的组织细胞取出放人纱布中包好放入包埋盒中。

对上述技术方案的进一步改进：所述的固定步骤之前增加预固定步骤，预固定步骤是将所述包埋盒放入装有10%中性缓冲甲醛的脱水缸中，置入超声波组织处理仪或医用微波炉中15分钟；

所述固定、脱水、透明、浸蜡步骤为：将固定好的组织细胞标本继续放入超声波组织处理仪或微波炉中，用环保型生物合成剂，温度45℃，时间12分钟，共3次；

浸蜡时间在温度为62℃条件下10分钟；使用环保型生物合成剂脱水、透明、浸蜡同时进行，以达到石蜡浸入组织细胞的目的；