[发明专利]一种基于聚电解质层层自组装技术制备亚油酸异构酶微胶囊的方法在审
申请号: | 201410142318.3 | 申请日: | 2014-04-02 |
公开(公告)号: | CN104974996A | 公开(公告)日: | 2015-10-14 |
发明(设计)人: | 赵国芬;张颜婷;张峰;贾丽;李晨曦 | 申请(专利权)人: | 内蒙古农业大学 |
主分类号: | C12N11/08 | 分类号: | C12N11/08;C12N11/04 |
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地址: | 010018 内蒙古自治区呼和浩特市赛*** | 国省代码: | 内蒙古;15 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 电解质 层层 组装 技术 制备 油酸 异构酶 微胶囊 方法 | ||
1.一种基于聚电解质层层自组装技术制备亚油酸异构酶微胶囊的方法,其特征在于所述方法具体步骤如下:
A.模板的制备:将0.33mol/L含碳酸根无机盐、0.33mol/L含钙离子无机盐和0.34mg/mL亚油酸异构酶按照体积比为1∶1∶1或1∶1∶2的比例均匀混合,混合后离心收集无定型碳酸钙晶体,即为模板,将模板用去离子水洗涤两次;
B.亚油酸异构酶微胶囊的制备:
(1)将步骤A所得模板移入1mL5mg/mL的带有正电性的聚电解质溶液中,悬浮吸附10min,离心弃去上清,用去离子水洗涤3次,使带有正电性的聚电解质被吸附在模板表面,即得第一层包覆有带正电性聚电解质的微粒;
(2)向步骤B(1)所得的微粒中加入1mL5mg/mL的带有负电性的聚电解质溶液,悬浮反应5min,离心弃去上清,用去离子水洗涤3次,即得包覆两层聚电解质的微粒;
(3)向步骤B(2)所得的微粒中加入1mL5mg/mL的带有正电性的聚电解质溶液,悬浮反应5min,离心弃去上清,用去离子水洗涤3次,即得包覆三层聚电解质的微粒;
(4)重复步骤B(2)和(3),直至八层,即得含有碳酸钙的亚油酸异构酶微胶囊,此时微胶囊粒径为549nm;
(5)通过分解方法将步骤B(4)所述的微胶囊中的碳酸钙去除,离心洗涤即得中空微胶囊,微胶囊中含有预先包埋的亚油酸异构酶,此时亚油酸异构酶的比活力为2080.3593U/mg,固定率为94.8416%,最适反应温度为50℃,最适反应pH为5,半衰期为29.5833天。
2.根据权利要求1所述基于聚电解质层层自组装技术制备亚油酸异构酶微胶囊的方法,其特征在于步骤A中所述含碳酸根无机盐为碳酸钠,含钙离子无机盐为氯化钙。
3.根据权利要求1所述基于聚电解质层层自组装技术制备亚油酸异构酶微胶囊的方法,其特征在于步骤B中所述带正电性聚电解质为聚烯丙胺盐酸盐,带负电性聚电解质为聚苯乙烯磺酸钠。
4.根据权利要求1所述基于聚电解质层层自组装技术制备亚油酸异构酶微胶囊的方法,其特征在于采用乙二胺四乙酸分解碳酸钙。
5.根据权利要求1所述基于聚电解质层层自组装技术制备亚油酸异构酶微胶囊的方法,其特征在于乙二胺四乙酸分解碳酸钙的同时也螯合掉了亚油酸异构酶活性中心的镁离子,为了恢复亚油酸异构酶的活性,需要添加含镁离子无机盐。
6.根据权利要求5所述基于聚电解质层层自组装技术制备亚油酸异构酶微胶囊的方法,其特征在于含镁离子的无机盐为氯化镁。
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