[发明专利]一种FGF-21突变体蛋白的制备及其在治疗非酒精性脂肪肝中的应用有效
申请号: | 201410150150.0 | 申请日: | 2014-04-08 |
公开(公告)号: | CN103923207A | 公开(公告)日: | 2014-07-16 |
发明(设计)人: | 任桂萍;朱升龙;李德山;王文飞;刘铭瑶;叶贤龙 | 申请(专利权)人: | 东北农业大学 |
主分类号: | C07K14/50 | 分类号: | C07K14/50;C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/18;A61P1/16;C12R1/19 |
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地址: | 150030 黑龙江省哈尔滨市香*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 fgf 21 突变体 蛋白 制备 及其 治疗 酒精性 脂肪肝 中的 应用 | ||
1.一种成纤维细胞生长因子-21突变体,其特征在于:其氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。
2.编码权利要求1所述的成纤维细胞生长因子-21突变体基因,其特征在于:其核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。
3.含有权利要求2所述成纤维细胞生长因子-21突变体基因的原核表达载体。
4.含有权利要求3所述原核表达载体的宿主细胞TransB(DE3)。
5.一种制备权利要求1所述的成纤维细胞生长因子-21突变体的方法,包括:将编码成纤维细胞生长因子-21突变体核苷酸序列与原核表达载体相连接,得到重组原核表达载体;载体本身携带分子伴侣SUMO,连接后形成SUMO与成纤维细胞生长因子-21突变体连接而成的融合基因;将该重组原核表达载体转化至宿主细胞TransB(DE3)中;诱导表达成纤维细胞生长因子-21突变体融合蛋白,分离纯化该融合蛋白,利用SUMO蛋白酶切除与其融合表达的分子伴侣部分,纯化,即得。
6.按照权利要求5所述的方法,其特征在于:所述的原核表达载体为pSUMO;所述的宿主细胞为TransB(DE3);所述的分子伴侣为小分子泛素样修饰蛋白。
7.按照权利要求5所述的方法,其特征在于:所述的成纤维细胞生长因子-21突变体核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示;成纤维细胞生长因子-21突变体氨基酸序列为SEQ ID NO:2所示。
8.按照权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的纯化包括:成纤维细胞生长因子-21突变体融合蛋白进行树脂亲和层析,依次经过洗涤、洗脱、脱盐;将酶切后的蛋白进行树脂亲和层析,即得。
9.一种治疗非酒精性脂肪肝的药物组合物,包括:治疗上有效的权利要求1所述的成纤维细胞生长因子-21突变体和药学上可接受的载体或辅料。
10.权利要求1所述的成纤维细胞生长因子-21突变体在制备治疗非酒精性脂肪肝药物中的应用。
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