[发明专利]流体荧光定量检测装置及方法有效
申请号: | 201410150265.X | 申请日: | 2014-04-15 |
公开(公告)号: | CN105021578B | 公开(公告)日: | 2019-04-19 |
发明(设计)人: | 章健 | 申请(专利权)人: | 杭州微瑞科技有限公司;章健 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 311599 浙江省杭州*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 流体 荧光 定量 检测 装置 方法 | ||
1.流体荧光定量检测装置,其特征在于,包括液体流动系统、光路系统和数据处理系统,其中:
液体流动系统包括吸液装置、石英管、微球约束腔和连接管;所述吸液装置用于抽吸溶液;所述石英管上端连接吸液装置,下端连接微球约束腔;所述微球约束腔用于使微球并列进入石英管,该微球约束腔包括有入口腔、限流口和出口腔,入口腔与连接管上端连接,出口腔与石英管下端连接,限流口为狭缝通孔,狭缝宽度小于微球在溶液中的最小自由距离;所述连接管下端浸入溶液中,用于作为液体流通的管路;
光路系统包括激发光产生装置、检测窗口、带通滤光片及光电转换器;所述激发光产生装置用于激发荧光标记物产生荧光;所述检测窗口开设在所述石英管中部,为一透光狭缝,狭缝开口方向与约束腔限流口开口方向平行;所述带通滤光片用于选择性透过所需波段的光;所述光电转换器用于将透过带通滤光片的光转换成电信号;
数据处理系统包括数据处理器和用户操作界面;所述数据处理器用于控制吸液装置和激发光产生装置,采集并处理光电转换器的光电数据;所述用户操作界面用于用户操作信息交互及输出检测结果。
2.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,所述限流口的开口宽度小于石英管内径。
3.根据权利要求2所述的装置,其特征在于,所述限流口的开口宽度为20μm~2mm。
4.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,所述检测窗口的透光狭缝宽度为0.1μm~1mm。
5.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,所述检测窗口包括荧光检测窗口和散射光检测窗口,所述带通滤光片包括荧光带通滤光片和散射光带通滤光片,所述光电转换器包括荧光光电转换器和散射光光电转换器。
6.应用权利要求1至5任何一项所述装置定量检测流体中目标物浓度的方法,其特征在于,步骤包括:
1)将标定了可结合目标检测物总量和结合系数的荧光标记物与聚集在标识微球表面的目标检测物进行结合反应;
2)抽取步骤1)得到的混合溶液,流经微球约束腔,使标识微球在石英管内并列且匀速地通过石英管;
3)连续采集流动溶液的标记荧光信号;
4)分辨标识微球表面所聚集的标记物荧光信号;
5)在连续的检测时间段内,计算标识微球的标记荧光强度和,以及溶液的全部标记荧光强度和,根据荧光标记物所标定的可结合目标检测物总量和结合系数,利用多元线性回归公式计算出目标检测物的含量。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述荧光标记物为粒径10nm~300nm的聚苯乙烯胶或硅烷荧光乳胶微粒。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述标识微球的直径为5~500μm。
9.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述标识微球为单分散微球。
10.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,步骤3),还包括连续采集流动溶液的散射光信号。
11.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,步骤4),通过参考荧光信号的波峰和波谷,或参考磁性微球的磁性特征,来分辨标识微球表面所聚集的标记物荧光信号。
12.根据权利要求10所述的方法,其特征在于,步骤4),通过参考荧光信号的波峰和波谷,或参考磁性微球的磁性特征,或参考微球的散射光信号,来分辨标识微球表面所聚集的标记物荧光信号。
13.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,步骤5),标识微球的标记荧光强度和设为e,溶液的全部标记荧光强度和设为E,利用e和E的比值,消除不同仪器或检测条件下探测荧光差异引起的结果差异。
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