[发明专利]一种利用木糖母液制备红曲制剂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用木糖母液制备红曲制剂的方法，属于微生物发酵技术领域。

背景技术

紫色红曲菌（Monascus purpureus)是红曲红色素和降血脂药的重要生产菌株，其发酵产物也被广泛应用于饮食烹饪。1995年，Blanc在红曲发酵产物中发现了肾毒素桔霉素（citrinin)，桔霉素会导致肾脏肿大，肾小管扩张，上皮细胞坏死，同时还具有致畸致癌作用，因此红曲产品的安全性受到了质疑。

传统的红曲霉培养方式以大米（淀粉）为原料，有调察显示中国市场内约有一半的红曲产品桔霉素含量超标（Yan li.,2012）。

为了降低红曲产品中桔霉素的产量，研究者对红曲菌进行大量的菌种改良和发酵工艺改良研究。这其中有对红曲霉菌株进行基因工程改造（周礼红,江南大学），使用60Co辐照诱变（许赣荣，江南大学），有研究利用大豆水解液为氮源优化发酵工艺降低桔霉素产量（陈蕴，江南大学）。

如中国专利文献CN102987180A（申请号201210536354.9）公开了一种低桔霉素红曲米的生产方法，其采用紫色红曲菌发酵大米而成，该方法的工艺步骤为：（1）将清洗干净的大米放入加有桔霉素抑制剂的水中浸泡；（2）浸泡后的大米经沥干、蒸米、降温、接种，再堆积培养后转入通风培养；所述通风培养期间通过补加水使物料的含水量保持在50wt%～70wt%，所述补加的水中加入有金属螯合剂；（3）所述通风培养结束前，向物料加入氧化剂以去除红曲米上的桔霉素；所述通风培养结束后，出料烘干，即可得到低桔霉素红曲米。

中国专利文献CN1807576A（申请号200610033131.5）公开了一种不含桔霉素的功能性红曲菌菌丝体的培养方法。该方法通过调节培养室或塑膜温室送风量排风量或敞开式通风系统，在菌丝体生长对数期以低浓度醋酸雾状物以及点燃稻草产生烟熏进行刺激,以及加大通气量,使菌丝体培养阶段昼夜间变温、调湿,调控培养基料含水量,保持淀粉质培养基料疏松，加速菌丝体生长速率及功能性代谢产物Monacolin K的合成和积累，同时有效抑制Monascidin A(Citrinin)的形成。但上述研究仍然不能满足市场的需求。

将玉米秸、玉米芯、棉籽壳、甘蔗渣、稻草、小麦秸秆等植物原料进行加压加热预处理以及酸水解后，再对水解液进行木糖浓缩结晶，在结晶分离后得到的废液——木糖母液；木糖母液采用菲林法测定其还原糖含量为3%～80%的生产废弃糖液；通常采用高效液相色谱法（HPLC）测定其可溶性糖为木糖、葡萄糖、阿拉伯糖各种糖的浓度，该废液的木糖含量为25～70%，葡萄糖含量为5～25%，阿拉伯糖含量为5～25%。针对上述木糖母液，目前还没有很好的利用方法。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种利用木糖母液制备红曲制剂的方法。

本发明的技术方案如下：

一种利用木糖母液制备红曲制剂的方法，包括如下步骤：

（1）将红曲霉菌株接种于PDA斜面培养基上，在25～35℃活化培养4～5天，制得活化菌株；

（2）将步骤（1）制得的活化菌株接种于PDA种子培养基中，在25～35℃、200rpm/min条件下，培养2～4天，制得发酵种子；

（3）将步骤（2）制得的发酵种子按照体积比1:10～1:5接种于红曲霉发酵培养基中，在25～35℃、200rpm/min条件下，培养7～10天，即得；

所述步骤（3）中的红曲霉发酵培养基，每升组分如下：

木糖母液30～50mL，NaNO32～4g，酵母提取物1g，K2HPO41g，KCl0.5g，MgSO4·7H2O0.5g，FeSO4·7H2O0.01g，水定容至1000mL，pH5～7。

根据本发明优选的，每升组分如下：

木糖母液30mL，NaNO33g，酵母提取物1g，K2HPO41g，KCl0.5g，MgSO4·7H2O0.5g，FeSO4·7H2O0.01g，水定容至1000mL，pH6。

根据本发明优选的，所述步骤（1）中的红曲霉菌株购自中国工业微生物菌种保藏管理中心（CICC），菌种保藏编号40943。本领域技术人员可以根据实际情况选择不同的红曲霉菌株进行制备红曲制剂。

根据本发明优选的，所述步骤（1）中的PDA斜面培养基，每升组分如下：

去皮马铃薯200g，切块，加水600mL煮沸30分钟，八层纱布过滤，加入20g葡萄糖，20g琼脂粉，定容至1000mL。