[发明专利]乳制品中β-环糊精的检测方法

权利要求书

1.一种乳制品中β-环糊精的检测方法，其特征在于：所述的检测方法包括以下步骤：

（1）将待测样品经蛋白沉淀处理，分离得液体，过滤，得待测样品溶液；

（2）将待测样品溶液进行高效液相色谱-示差折光检测，即可；

所述的示差折光检测的温度为30-50℃；

所述的高效液相色谱法的检测条件包括：

流动相：流动相A：甲醇，流动相B：水，所述的流动相A和流动相B的体积比为（3：97）-（10：90）。

2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤（2）中，所述的示差折光检测的温度为40℃。

3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤（1）中，所述的蛋白沉淀处理的方法包括以下步骤：将所述的待测样品置于35-55℃温度条件下提取1-10min，再与蛋白沉淀剂混合均匀，即可。

4.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于：其中，所述的蛋白沉淀剂为亚铁氰化钾、乙酸锌、乙酸铅、草酸锰-磷酸氢二钠，硫酸铜、乙腈和乙醇中的一种或多种；所述的待测样品与所述的蛋白沉淀剂的质量比较佳地为（1-5）：（0.01-0.04），更佳地为（1-5）：（0.015-0.03）；所述的提取的温度较佳地为40℃；所述的提取较佳地为震荡提取，更佳地为水浴振荡提取；所述的提取的时间较佳地为1-5min，更佳地为2min。

5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤（1）中，所述的分离为离心分离；所述的离心分离的离心速度较佳地为3000-5000r/min，更佳地为4000r/min；所述的离心分离的时间较佳地为5-10min，更佳的为5min；所述的过滤的滤膜的孔径为0.45μm。

6.如权利要求1-5中任一项所述的检测方法，其特征在于：步骤（1）为：将5g的待测样品在40℃条件下震荡提取1-5min，加入21.9%的乙酸锌溶液1mL和10.6%的亚铁氰化钾溶液1mL，混合均匀，在4000r/min速度下离心5min，过滤，得待测样品溶液。

7.如权利要求1-5中任一项所述的检测方法，其特征在于：步骤（2）中，所述的检测条件还包括色谱柱、柱温、流速或进样体积；

所述的色谱柱较佳地为C18反相液相色谱柱，更佳地为Waters Atlantis T3色谱柱、Agilent Eclipse Plus C18色谱柱或Agilent Zorbax SB-Aq色谱柱；所述的Agilent Eclipse Plus C18色谱柱的规格较佳地为4.6×100mm，3.5μm；所述的Waters Atlantis T3色谱柱的规格较佳地为2.1×150mm，5μm；

所述的柱温较佳地为30-50℃，更佳地为40℃；

所述的流速较佳地为0.6-1.2mL/min，更佳地为1.0mL/min；

所述的进样体积较佳地为10-20μL，更佳地为10μL。

8.如权利要求1-5中任一项所述的检测方法，其特征在于：所述的高效液相色谱法检测的检测条件为：

色谱柱：Agilent Eclipse Plus C18色谱柱；

流动相：流动相A：甲醇；流动相B：水；所述的流动相A和流动相B的体积比为3：97；

柱温：40℃；

流速：1.2mL/min；

进样体积：10μL。

9.如权利要求1-5中任一项所述的检测方法，其特征在于：步骤（1）中，所述的待测样品为乳制品，较佳地为低胆固醇牛奶、低胆固醇稀奶油、低胆固醇乳饮料、零胆固醇牛奶、零胆固醇稀奶油和零胆固醇乳饮料中的一种或多种。

10.如权利要求1-5中任一项所述的检测方法，其特征在于：所述的检测后，按标准曲线法计算待测样品中β-环糊精的含量。