[发明专利]一种用于检测作用于Cry1A类原毒素的胰蛋白酶活力的荧光底物及其应用有效
申请号: | 201410155233.9 | 申请日: | 2014-04-17 |
公开(公告)号: | CN103923175A | 公开(公告)日: | 2014-07-16 |
发明(设计)人: | 杨亦桦;武淑文;吴益东 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C12Q1/37;C12R1/07 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;徐冬涛 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 cry1a 毒素 胰蛋白酶 活力 荧光 及其 应用 | ||
1.一种用于检测昆虫中肠胰蛋白酶活力的荧光多肽底物R28,其特征在于组成为:荧光淬灭基团-Gly-GLy-Glu-Arg-Ile-Glu-Thr-Gly-Glu-荧光基团。
2.根据权利要求1所述的荧光多肽底物R28,其特征在于所述的荧光淬灭基团为Dabcyl和所述的荧光基团为Edans。
3.权利要求1所述的荧光多肽底物R28在检测直接作用于活化苏云菌芽孢杆菌Cry1A类原毒素的昆虫中肠胰蛋白酶活力中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于所述的昆虫来自于不同种群。
5.一种检测昆虫中肠酶液对苏云菌芽孢杆菌Cry1A类原毒素酶解能力的方法,其特征在于包括以下步骤:
1)提取鳞翅目昆虫幼虫中肠的酶液或BBMV;
2)利用胰蛋白酶标准品建立其对权利要求1所述的荧光多肽底物R28酶解反应的标准曲线;
3)测定昆虫中肠酶液对荧光底物的酶解活力,对照标准曲线,计算出中肠酶液中能直接作用于荧光底物R28的胰蛋白酶的浓度,从而明确中肠酶液对所述苏云菌芽孢杆菌Cry1A类原毒素的酶解能力。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于所述的鳞翅目昆虫来自不同种群。
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