[发明专利]一种借助辐照辅助酶解技术提高玉米肽抗氧化活性的方法有效
申请号: | 201410155319.1 | 申请日: | 2014-04-17 |
公开(公告)号: | CN103898185A | 公开(公告)日: | 2014-07-02 |
发明(设计)人: | 张鸣镝;邢杰;林松毅;王可;刘静波 | 申请(专利权)人: | 吉林大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/34 |
代理公司: | 长春吉大专利代理有限责任公司 22201 | 代理人: | 王恩远 |
地址: | 130012 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 借助 辐照 辅助 技术 提高 玉米 氧化 活性 方法 | ||
1.一种借助辐照辅助酶解技术提高玉米肽抗氧化活性的方法,其特征在于,以蛋白质含量45%~60%、颗粒细度150~200目的玉米蛋白粉为原料,经快中子电子束辐照、碱性蛋白酶可控酶解、灭酶和离心、超滤、喷雾干燥过程,使被辐照处理后的玉米蛋白粉在适宜的蛋白酶作用下酶解3h,水解度由42.13%提高至48.23%以上,玉米抗氧化肽粉的DPPH清除率由70.16%提高至78.65%以上;
1)所述的快中子电子束辐照过程,是以蛋白质含量45%~60%、颗粒细度150~200目的玉米蛋白粉为原料,按照每袋100~500g的重量分装保存于自封袋中,置于速度为2~20m/h的输送带上,输送进入快中子电子束辐照室循环照射,使物料吸收的辐照剂量为5K~140K,获得玉米蛋白辐照粉;
2)所述的碱性蛋白酶可控酶解过程,是以蛋白质含量45%~60%的玉米蛋白辐照粉为底物,按照重量比用20~50℃水配制底物浓度为2%~7%的蛋白溶液体系;再用磁力搅拌器处理蛋白溶液体系,搅拌温度控制在50~65℃,搅拌时间为5~10min;而后再置于85~95℃的水浴锅中加热变性10~35min,冷却后至胃蛋白酶的适宜酶解温度为45~65℃,调节pH值为7.5~10.5,按[E]/[S]为6%~12%加入胃蛋白酶,用1M的NaOH控制肽液的pH值变化在±0.04内,控制酶解时间为3h,收集酶解液置于85~95℃的水浴锅中加热灭酶5~15min后计算酶解过程的水解度为48.23%以上;
3)所述的灭酶和离心过程,是将酶解液进行离心处理,离心温度为2~10℃、转速为6000~12000×g,离心时间为5~30min,收集上清液并将pH值调节至7后4℃冷藏备用;
4)所述的超滤过程,是将4℃保藏的上清液升温至10~25℃后进行超滤处理,采用清洁的超滤膜的分子量截留值为3k~10kDa,超滤流速为6~15mL/min、超滤压力为0.1~0.2MPa,收集超滤膜下液,冷藏备用;
5)所述的喷雾干燥过程,是调节进风温度为150~200℃,超滤膜下液的进样速度为30~60mL/min,离心雾化器转速为15000~25000r/min,获得玉米抗氧化肽粉,测定其DPPH清除率为78.65%以上。
2.根据权利要求1所述的一种借助辐照辅助酶解技术提高玉米肽抗氧化活性的方法,其特征在于,碱性蛋白酶可控酶解过程中所需用水选择纯净水、去离子水、渗透水和蒸馏水中的任意一种。
3.根据权利要求1所述的一种借助辐照辅助酶解技术提高玉米肽抗氧化活性的方法,其特征在于,所述的分子量截留值为3k~10k Da超滤膜,使用之前需要经35~50℃热水冲洗1~2次,再经35~50℃的0.05~0.1mol/L的NaOH溶液冲洗1~2次,最后再用10~25℃的水进行冲洗1~2次。
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