[发明专利]一种骨髓去分化间充质干细胞的培养方法

权利要求书

1.一种骨髓去分化间充质干细胞的培养方法，包括以下步骤：

第一步，从骨髓中分离获得间充质干细胞；

第二步，将间充质干细胞在间充质干细胞完全培养基中进行细胞培养；

其特征在于，第二步所述的细胞培养的步骤中，还包括更换诱导培养基进行诱导培养的步骤。

2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述的诱导培养为将所述的间充质干细胞在诱导培养基中培养3-10天，优选的为5-7天。

3.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述的间充质干细胞为人骨髓间充质干细胞，优选的为3-5代的人骨髓间充质干细胞。

4.根据权利要求3所述的培养方法，其特征在于，所述的人骨髓间充质干细胞具有能分化为成骨的能力。

5.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述的诱导培养基为成骨诱导培养基。

6.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述第二步的细胞培养为将细胞培养至处于对数生长期，优选的，培养至细胞密度达到70%-90%时，弃去所述间充质干细胞完全培养基，更换诱导培养基进行诱导培养。

7.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，在所述的诱导培养的步骤之后，弃去诱导培养基，将细胞重新置于间充质干细胞完全培养基中培养并传代得到De-MSCs细胞，优选的，培养并传代12-14天。

8.根据权利要求1-7任一项所述的培养方法，其特征在于，在更换诱导培养基的之前和之后还包括将培养基残液清除的步骤。

9.根据权利要求1-7任一项所述的培养方法，其特征在于，所述的清除的步骤为用PBS进行清洗，优选的PBS清洗2-3次。

10.根据权利要求1-7任一项所述的培养方法，其特征在于，所述的诱导培养基由以下成分配制而成：DMEM-L培养基、10%胎牛血清、青霉素100U/mL、链霉素100mg/L、L-抗坏血酸50ug/ml、β-磷酸甘油钠10mmol/ml、地塞米松10^-8mmol/ml。