[发明专利]PCSK9拮抗剂

说明书

技术领域

本发明涉及单克隆技术领域，具体涉及一种PCSK9拮抗剂。 

背景技术

蛋白原转化酶枯草溶菌素-可新9型(proprotein convertase subtilisin-kexin type9)(下文称为“PCSK9”)，又名神经凋亡调节转化酶1(“NARC-1”)，是一种蛋白酶K样枯草杆菌酶，经鉴定为分泌型枯草杆菌酶家族的第9个成员；(Seidah等，2003PNAS100：928-933)。编码PCSK9的基因定位在人染色体1p33-p34.3；Seidah等，见上文。PCSK9在能够增殖和分化的细胞中表达，包括例如肝细胞、肾间质细胞、回肠(intestinal ileum)和结肠上皮以及胚胎端脑神经元(Seidah等，2003PNAS100：928-933)。 

PCSK9在肝细胞和神经元细胞的分化中发挥作用(Seidah等，2003PNAS100：928-933)，在胚胎肝脏中高表达，并且与胆固醇体内平衡强烈相关。最近的研究似乎暗示了其在胆固醇生物合成或摄取中的特定作用。在饲喂胆固醇的大鼠的研究中，Maxwell等发现，PCSK9以类似于牵涉胆固醇生物合成的三个其他基因的方式被下调(Maxwell等，2003J.Lipid Res.44：2109-2119)。有趣的是，和牵涉胆固醇代谢的其它基因一样，PCSK9的表达也受甾醇调控元件-结合蛋白(“SREBP”)的调控(Maxwell等，2003J.Lipid Res.44：2109-2119)。后来研究证明此类调控在参与脂蛋白代谢的其它基因中非常典型(Dubuc等，2004Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.24：1454-1459)。PCSK9的表达被他汀类(statins)上调，这是由于这些药物的降胆固醇效应。此外，PCSK9启动子有两个涉及胆固醇调控的保守性位点、甾醇调控元件和Sp1位点；见上文。PCSK9的腺病毒表达已显示可导致循环LDL显著的时间依赖性增加(Benjannet等，2004J.Biol.Chem.279：48865-48875)。此外，删除PCSK9基因的小鼠肝LDL受体水平增加，LDL从血浆中清除更快；Rashid等，2005Proc.Natl.Acad.Sci.USA102：5374-5379。最近据报道，将用PCSK9瞬时转染的HepG2细胞的培养基转移到未转染的HepG2细胞时，减少细胞表面LDLR的数量和LDL的内化；参见Cameron等，2006Human Mol.Genet.15：1551-1558。结论是PCSK9或者经PCSK9作用的因子被分泌并能够降解转染的和未转染的细胞中的LDLR。更近来，据证实，加到HepG2细胞培养基中的纯化PCSK9具有以剂量和时间依赖性方式减少细胞表面LDLR数目的作用(Lagace等，2006J.Clin.Invest.116：2995-3005)。 

PCSK9基因中的很多突变已确定与以下病症相关：常染色体显性高胆固醇血症(“ADH”)、以血浆中低密度脂蛋白(“LDL”)颗粒显著升高为特征的遗传性代谢紊乱(可 导致早发性心血管衰竭)；（Abifadel等，2003Nature Genetics34：154-156；Timms等，2004Hum.Genet.114：349-353；Leren，2004Clin.Genet.65：419-422）。后来Abifadel等发表的对S127R突变的研究报道，携带这种突变的患者血浆中总胆固醇和apoB100较高，原因是(1)含有apoB100的脂蛋白例如低密度脂蛋白(“LDL”)、极低密度脂蛋白(“VLDL”)和中密度脂蛋白(“IDL”)的过量产生，和(2)所述脂蛋白清除或转化的相关减少。 

综合起来，上述研究证实了PCSK9在调控LDL产生中起作用的事实。PCSK9的表达或上调与增加的LDL胆固醇的血浆水平有关，PCSK9表达的抑制或缺乏与LDL胆固醇血浆水平低有关。值得注目的是，与PCSK9序列变化相关的较低水平的LDL胆固醇可提供针对冠心病的保护（Cohen，2006N.Engl.J.Med.354：1264-1272）。临床试验已证明LDL胆固醇含量减少与冠状动脉(coronary)事件率直接相关（Law等，2003BMJ326：1423-1427）。此外，最近已证明，血浆LDL胆固醇含量终生中度减少与冠状动脉事件的发生率大幅减少显著相关；甚至在非脂质相关心血管风险因子高度盛行(prevalence)的群体中也是如此。因此，对LDL胆固醇含量进行管理控制大有裨益。