[发明专利]BLyS拮抗肽、含TC-Fc融合蛋白基因的质粒及TC-Fc融合蛋白

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，特别是涉及命名为TC的BLyS拮抗肽、含TC-Fc融合蛋白基因的质粒及TC-Fc融合蛋白。

背景技术

B淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator,BLyS)，又称为B细胞激活因子(B cellactivating factor belonging to the TNF family,BAFF)，是TNF家族中的一员。由单核细胞和巨噬细胞持续合成、分泌。BAFF能够结合B细胞表面的三种受体，B细胞成熟抗原(B cell mature antigen,BCMA)，跨膜激活物和CAML结合物(Transmembrane activator and CAML-interactor,TACI)以及BAFF受体3(BR3)。受体结合BAFF后，偶联TNF受体相关因子(TNF receptor associated factor,TRAF)，激活NF-ΚB途径。最终，诱导抗细胞凋亡基因：Bcl-2、Bcl-xL的表达，减少成熟B细胞的凋亡。如果敲除BAFF，小鼠体内的成熟B细胞完全缺失。因此，BAFF在B细胞的发育和成熟过程中起至关重要的作用。

由于BLyS在B淋巴细胞活化、增殖中发挥重要作用，而B淋巴细胞产生的抗体所介导的体液免疫在众多已发现的自身免疫性疾病当中处于中心地位。因此，目前认为BLyS在体内的过量表达与某些自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿性关节炎（RA）、口眼干燥综合征(Siogren)等病程的发生、发展密切相关。过量表达BLyS的转基因小鼠出现系统性红斑狼疮样症状(13)。临床实验也发现，SLE和Siogren综合征病人的血清中，可溶性BLyS明显高于正常人。同时，作为B细胞刺激、存活因子，BLyS及其受体参与骨髓瘤和淋巴瘤的发生和发展。因此，以阻断BLyS生物学功能为策略，探讨BLyS拮抗剂治疗系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎等自身免疫性疾病和B细胞肿瘤疾病的研究正在国外如火如荼的进行中。目前，针对BLyS的抑制剂的研究主要集中在研制具有中和BLyS作用的BLyS诱饵受体（decoy receptor）、抗BLyS抗体和拮抗肽^（1，2）。2011年3月美国FDA批准由人类基因科学公司（Human Genome Sciences）和葛兰士-史克（GlaxoSmithKline）公司联合研发的抗BLyS抗体BENLYSTA(Belimumab)治疗系统性红斑狼疮。这是50年来，FDA首次批准治疗该类疾病的药物。因此，BLyS拮抗剂有着广泛的临床应用前景。

众多研究已经详细阐述BLyS与受体相互作用的可能模式及关键氨基酸。所以，针对BLyS与其受体结合核心区域的拮抗肽也成为BLyS抑制剂的策略。我们在前期工作中探讨了BLyS拮抗肽抑制BLyS的功能，初步结果显示：合成的16个氨基酸肽体外能够部分抑制BLyS的作用^（3）。进一步通过计算机分子模建、优化设计BLyS拮抗肽，将有望提高其抑制BLyS生物学功能。为开发治疗SLE和RA这类自身免疫性疾病和B细胞肿瘤的新药奠定实验研究基础。

1.Sun J（孙剑）,Lin Z,Feng J,Li Y and Shen B(2008)BAFF-targeting therapy,a promising strategy for treating autoimmune diseases.Eur J Pharmacol597:1–5.

2.Sun J（孙剑）,Lin Z,Feng J,Li Y and Shen B(2008)B lymphocyte stimulator,a new target for treating B cell malignancies.Chinese Medical J121(14):1319-1323.

3.Sun J（孙剑）,Feng J,Li Y and Shen B(2006)A novel BLyS antagonist peptide designed based on the3-D complex structure of BCMA and BLyS.Biochem Biophys Res Commun346(4):1158-1162.

与抗体和诱饵蛋白等大分子拮抗剂相比，多肽具有分子量小、渗透性强、人工合成简单、免疫原性低，毒性低和副作用少的优点。然而，多肽也存在不稳定、效率低和半衰期短的缺点。

发明内容