[发明专利]一种快速检测氨基甲酸乙酯含量的化学检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及氨基甲酸乙酯的检测技术领域，具体涉及一种快速检测氨基甲酸乙酯含量的化学检测方法。

背景技术

氨基甲酸乙酯 （Ethyl Carbamate，简称EC，又称Urethane），不仅是烟草叶及香烟的天然成分，也是发酵食品（如面包，酸牛奶，乳酪，酱油等）和酒精饮料（如葡萄酒，中国黄酒，日本清酒等）生产过程中的伴随产物。早在20世纪40年代，Nettleship就证明了氨基甲酸乙酯具有致癌作用。氨基甲酸乙酯的致癌作用首先在小鼠的肺部细胞中发现的，之后的相关研究表明氨基甲酸乙酯可以在动物体内造成多位点致癌，如皮肤、肝脏、淋巴组织等。2002年氨基甲酸乙酯已经成为联合国粮农组织重点监控物质，并制定了国际标准，其含量不得超过20μg/L。2007年国际癌症研究机构认定EC为2A类致癌物质，与丙烯酰胺同等危险。

为了降低发酵饮料和食品中氨基甲酸乙酯的含量，各国政府都在采取措施，其中简便、快速、准确的EC含量检测方法的研究就是其中之一。国内外对于EC含量的检测方法的研究，从气相色谱发展到高精密度的GC/MS，乃至更高精密度的GC/MS/MS。随后，又出现了HPLC-FLD法，HPLC/MS/MS法以及傅立叶变换红外光谱法等。但是，上述方法存在仪器设备昂贵，难以普及等缺点，尚不能满足简便、快速、准确以及成本低的要求。因此，准确、快速的EC含量检测方法无疑是迫切解决的内容以及未来的研究方向。

国内外有报道将化学法应用到氨基甲酸酯类农药上。对二甲氨基苯甲醛法，是一种经典的测定尿素含量的方法，具有操作简便、反应时间短、显色稳定、相对准确的优点。但是应用化学方法检测EC的研究尚未见报道。

本发明提供一种快速、低成本检测氨基甲酸乙酯含量的方法。利用氨基甲酸乙酯与对二甲氨基苯甲醛（PDAB）在酸性条件下进行 Ehrlich反应, 形成柠檬黄色衍生物即对二甲胺基苯亚甲基胺基甲酸乙酯，其质量浓度与吸光度符合比尔定律，从而可用分光光度法进行分析。

发明内容

本发明提供一种快速检测氨基甲酸乙酯含量的化学检测方法，利用氨基甲酸乙酯与对二甲氨基苯甲醛（PDAB）在酸性条件下进行 Ehrlich反应，形成柠檬黄色衍生物-对二甲胺基苯亚甲基胺基甲酸乙酯，氨基甲酸乙酯的质量浓度与柠檬黄色衍生物的吸光度呈正相关，即氨基甲酸乙酯浓度越大吸光度越大。根据吸光度的大小和标准曲线即可计算氨基甲酸乙酯的浓度。

本发明提供一种快速检测氨基甲酸乙酯含量的化学检测方法，具体步骤为：

标准曲线的制备： 

（1）取1-3mL酸溶液，再加入2-5mL的对二甲氨基苯甲醛-乙醇溶液；

（2）分别加入浓度为0.05g/L、0.1 g/L、0.2 g/L、0.3 g/L、0.4 g/L、0.5 g/L、1 g/L、2 g/L的氨基甲酸乙酯标准溶液1-4mL，定容后混匀，反应；

（3）反应结束后，在430-450nm波长范围内用比色皿比色，以不加EC的试管作参比，分别记录吸光值A₁、A₂、A₃、A₄、A₅、A₆、A₇和A₈ ，以EC的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标作图，即氨基甲酸乙酯的标准曲线；

氨基甲酸乙酯的含量的测定：

（1）取1-3mL酸溶液，再加入2-5mL的对二甲氨基苯甲醛-乙醇溶液；

（2） 加入1-4mL的氨基甲酸乙酯标准溶液，定容后混匀，反应；

（3）反应结束后，在430-450nm波长范围内用比色皿比色，记录吸光度，利用所得的氨基甲酸乙酯的标准曲线，计算得到氨基甲酸乙酯的含量。

进一步优化的，所述氨基甲酸乙酯购自阿拉丁试剂（上海）有限公司，其纯度为99%以上；所述氨基甲酸乙酯与对二甲氨基苯甲醛需在酸性条件下发生Ehrlich反应，所述酸溶液为盐酸与蒸馏水按照体积比为1:2-2:1的比例混合的溶液，所述酸溶液用量为1-3mL。

进一步优化的，所述对二甲氨基苯甲醛-乙醇溶液浓度为3-6g对二甲氨基苯甲醛溶于100mL乙醇中，即3-6g/100mL乙醇。

进一步优化的，所述反应为在水浴温度15-55℃下反应15-60min。

进一步优化的，所述定容为用蒸馏水定容至10mL。

本发明的对二甲氨基苯甲醛法与现有技术相比，具有以下优点：