[发明专利]一种大伏革菌及其在防治中国针叶树根腐病上的应用

说明书

技术领域

本发明属微生物技术领域，涉及一种生物防治中国针叶树根腐病的菌种及其应用，特别是涉及一种大伏革菌及在防治中国针叶树根腐病上的应用。

背景技术

针叶树根腐病是北温带地区普遍分布的一种重要病害，在亚热带地区仅局部分布，危害较小。根据植物病害分布地图，该病害在美国、加拿大、法国、德国、印度、日本等全球40多个国家均有分布。据调查，该病害在我国东北林区甚为常见，在四川省西部和云南省西北部高山针叶林区内也比较普遍，在云南铁杉、黄栎林内有时也能见到。该病害常导致针叶树幼林内大量林木死亡，在成年林或过熟林内，根白腐常导致干基腐朽，严重影响经济用材的出材率；而且由于根腐病常引起根部死亡，导致林木生长量的降低，其在经济上的损失更大。

针叶树根腐病的病原菌是异担子菌Heterobasidion，能引起针叶树根腐病的异担子菌有5个生物种，分别是狭义多年异担子菌H.annosum(Fr.)Bref.sen sostricto、小孔异担子菌H.parviporum Niemela&Korhonen、冷杉异担子菌H.abietienum Niemela&Korhonen、异孔异担子菌H.irregulare Garbelotto&Otrosina和西方异担子菌H.occidentale Otrosina&Garbelotto。虽然，该病害在我国的病原菌并不是欧洲和北美地区真正的多年异担子菌Heterobasidion annosum，而是小孔异担子菌H.parviporum，但是，在欧洲和北美引起严重病害的多年异担子菌随进口原木传入、扩散和定殖我国的风险很大，需要防患于未然。该病害自1800年发现到现在，很多国家对其防治方法及各种防治方法的生态影响都进行了深入的研究。到目前为止，主要的防治方法有营林措施防治、化学防治和生物防治。

营林措施防治包括在营林过程中，避免在有利于异担子菌生长的土壤上造林，如酸性和营养丰富及砂质土壤；对感染的树种要避免营造纯林；对林分进行抚育时，选择在冬天进行；对伐桩进行妥善处理；对已发生异担子菌侵染并造成死亡的树木进行深埋和烧毁等。但是营林防治不能在根本上抑制针叶树根腐病的发生。

化学防治是利用杂酚油、尿素、硼砂和氯氧化铜等处理已感染病原菌的树干基部，但是化学防治不能有效控制周围树木的感染，并且化学药剂会对生态环境造成一定的影响。

生物防治是基于以下原理：自然界中很多腐生真菌在相同生境条件下比异担子菌生长迅速，能够侵占更多的营养物质和生态位，因此可以抑制异担子菌的侵染和扩散。生物防治能有效抑制异担子菌对林木的侵染，可以将由异担子菌引起的干基腐朽高度控制在最低，并且能够控制病原菌的传播速率，不会对生态环境造成影响，因此生物防治具有更广阔的应用前景。

大伏革菌(Phlebiopsis gigantea)是一种白色腐朽真菌，广泛腐生于针叶树死树特别是伐桩上，和异担子菌构成营养竞争关系，同时干涉异担子菌菌丝生长，具有拮抗异担子菌的能力，其产生的胞外纤维素酶能够降解树木细胞壁纤维素结构，达到快速定殖于伐桩的目的，故胞外纤维素酶活可作为高效生防菌株筛选的指标之一。

尽管国外已有国家利用大伏革菌防治异担子菌引起的针叶树根腐病，但是针对我国针叶树根腐病的致病菌小孔异担子菌的生物防治还未见报道。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中存在的问题，提供一种防治中国针叶树根腐病的大伏革菌高效菌株及其应用。

本发明菌株已于2013年12月18日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)保藏，分类命名为大伏革菌(Phlebiopsis gigantea)，在CGMCC的保藏号为：CGMCC No.8653。

本发明的大伏革菌菌株CGMCC No.8653，可以通过下列两种方法分离得到：

1、基质分离法：取采集的大伏革菌子实体下的木组织，将其上、下表面及四周用刀切掉，露出中间的木材组织，将处理过的木材组织在酒精灯焰上移动几次进行表面消毒灭菌，然后在无菌条件下将其切成2mm×6mm的长段(片)接种于麦芽汁培养基(麦芽浸粉20.0g/L，琼脂粉18.0g/L，KH₂PO₄3.0g/L，pH自然，121℃高压灭菌30min)上，在28℃条件下恒温培养，3–5天后可见白色菌丝出现，挑取菌丝进行纯化后保存，每个子实体重复3次。