[发明专利]一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法有效
申请号: | 201410165030.8 | 申请日: | 2014-04-23 |
公开(公告)号: | CN103898084A | 公开(公告)日: | 2014-07-02 |
发明(设计)人: | 赵丽芳;苏俊兵;蔡晓龙 | 申请(专利权)人: | 北京昕大洋科技发展有限公司 |
主分类号: | C12N9/96 | 分类号: | C12N9/96;C12N9/46;C12N9/42;C12N9/16;A23K1/165 |
代理公司: | 北京中建联合知识产权代理事务所 11004 | 代理人: | 李聚 |
地址: | 100081 北京市海淀区中关*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 稳定性 液体 复合 制备 方法 | ||
1.一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法,其特征在于具体包括下列步骤:
选用高产单酶菌株进行大规模液体深层工业发酵,产出单酶含量较高的发酵液;
将步骤A液体发酵产出的发酵液过碟片离心机,得到单酶的酶清液;
将单酶的酶清液过陶瓷膜,截留残留菌体和比酶分子大的颗粒,收集清液得到单酶陶清液;
将单酶陶清液过有机膜,截留酶分子,排出小分子的杂蛋白、无机盐和部分水,使酶液浓缩,得到单酶浓缩酶液;
在所得单酶浓缩酶液中加去离子水进行稀释,得到单酶的稀释酶液;
在所得单酶的稀释酶液中加入沉降剂、稳定剂和防腐剂,并调节pH至4.4~5.5,置于玻璃钢罐体中进行自然沉降;
通过玻璃钢罐体侧壁上的清液放料口取出沉降好的单酶清液,放置备用;
按照步骤A~G的方法制备出生产饲用液体复合酶所需要的几种单酶清液;
在去离子水中加入稳定剂、防腐剂,并调节pH至4.4~5.5,得到稀释液;
将步骤H中沉降好的多种单酶清液和步骤I中制备的稀释液进行均匀混合,单酶清液与稀释液的混合比例根据实际酶活和酶种类的需要进行配比,至此,液体复合酶制备完成。
2.根据权利要求1所述的一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法,其特征在于:所述步骤A或H中的单酶为非淀粉多糖单酶或植酸酶。
3.根据权利要求2所述的一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法,其特征在于:所述步骤C中陶瓷膜的孔径范围为0.05~0.1μm。
4.根据权利要求2所述的一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法,其特征在于:所述步骤D中有机膜截留小分子的分子量为8000~10000。
5.根据权利要求2所述的一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法,其特征在于:所述步骤E中稀释酶液的最终稀释浓度为:纤维素酶3000~5000U/g,其他种类单酶的酶活为3~5万U/g。
6.根据权利要求1所述的一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法,其特征在于:所述步骤F中的沉降剂为十二水合硫酸铝钾、硫酸锌,其添加量为重量比稀释酶液:十二水合硫酸铝钾:硫酸锌=100:0.5~0.6:0.3~0.5。
7.根据权利要求1所述的一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法,其特征在于:所述步骤F中的稳定剂为山梨糖醇、葡萄糖、硫酸镁和乙酸钠,其添加量为重量比稀释酶液:山梨糖醇:葡萄糖:硫酸镁:乙酸钠=100:8~12:3~6:0.8~1.3:3~6。
8.根据权利要求1所述的一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法,其特征在于:所述步骤F中的防腐剂为苯甲酸钠、山梨酸钾、卡松和氯化钠,其添加量为重量比稀释酶液:苯甲酸钠:山梨酸钾:卡松:氯化钠=100:0.1~0.25:0.4~0.6:0.15-0.25:10~14。
9.根据权利要求1所述的一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法,其特征在于:所述步骤I中的稳定剂为山梨糖醇、葡萄糖、硫酸镁和乙酸钠,其添加量为重量比去离子水:山梨糖醇:葡萄糖:硫酸镁:乙酸钠=100:8~12:3~6:0.8~1.3:3~6。
10.根据权利要求1~9所述的一种高稳定性饲用液体复合酶的制备方法,其特征在于:所述步骤I中的防腐剂为苯甲酸钠、山梨酸钾、卡松和氯化钠,其添加量为重量比去离子水:苯甲酸钠:山梨酸钾:卡松:氯化钠=100:0.1~0.25:0.4~0.6:0.15~0.25:10~14。
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