[发明专利]黄瓜叶色突变基因v-1的SSR标记及其应用

权利要求书

1.一种与黄瓜叶色突变基因v-1紧密连锁的SSR标记，其引物的核苷酸序列如下：

SSR8^v-1-F/SSR8^v-1-R：GGCAATGGTAAAGGTTGGAA/AAGGGATGTGTGGTGTGGTT；

所述引物扩增的与叶色突变基因v-1连锁的SSR标记特征条带为194bp，核苷酸序列如Seq ID No.1所示；

所述引物扩增的与叶片绿色基因V-1连锁的SSR标记特征条带为206bp，核苷酸序列如Seq ID No.2所示。

2.权利要求1所述SSR标记在筛选具有叶色突变基因v-1的黄瓜种质资源中的应用，其步骤如下：

(1)采用所述SSR标记的引物对待选黄瓜品种的基因组DNA分别进行PCR扩增；

(2)对扩增结果进行凝胶电泳检测；

(3)从检测结果中选出与叶色突变基因v-1连锁的SSR标记特征条带一致的材料。

3.根据权利要求2或3所述的应用，所述PCR扩增的反应体系为:3μL DNA(2.5ng·μL-1)，正向和反向引物(50ng·μL-1)各1μL，5μL GoGreen Master Mix，加双蒸水至10μL。

4.根据权利要求2或3所述的应用，所述PCR扩增的程序为：94℃预变性4min；94℃变性15s；55℃退火15s；72℃延伸30s；35个循环；72℃保温5min；4℃保存。

5.根据权利要求2～4任一所述的应用，所述凝胶电泳检测指采用8.0％的非变性聚丙烯酰胺凝胶，于160V恒功率电泳分离，最后银染显色。