[发明专利]一种高纯度丹酚酸B的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种中药活性组分的分离纯化方法，尤其涉及一种从丹参中制备丹酚酸B的方法。

背景技术

丹参来源于唇形科鼠尾草属植物丹参(Salvia miltiorrhiza)的干燥根及根茎。丹参广泛的应用于心脑血管疾病、肝病、肾病、糖尿病并发症、神经系统疾病的治疗。丹参中主要的活性组分包括脂溶性菲醌类化合物(以丹参酮ⅡA为代表)和水溶性丹酚酸类化合物(以丹酚酸B为代表)。由于中药的使用方法以水煎煮为主，所以丹参的水溶性组分吸引了大家的广发注意。丹酚酸B是含量最高的丹参水溶性组

分，文献报道其具有抗氧化、清除自由基、对抗血小板凝集、抗炎、抗肿瘤等活性。丹参主要水溶性组分结构：

丹参水溶性组分结构相似、性质相近，很难通过常规的方法将其中各个单体有效分离，这严重限制了其作为新药开发的进展。很多人研究了丹酚酸B高纯度产品的制备工艺。中国专利(申请号200710166155.2)采用酸水提取丹参药材，提取物经过聚酰胺树脂纯化，纯化产物再次经过大孔吸附树脂纯化，然后经过溶剂法精制，产物最终经过Sephadex LH-20或者反相硅胶柱层析纯化，最终可以得到纯度超过98％的丹酚酸B样品。然而，该工艺步骤繁琐，操作复杂且成本较高，难以满足丹酚酸B纯品的大量工业制备。中国专利(200810041104.1)是目前报道的最适用于大量生产的丹酚酸B制备工艺。该工艺采用水提取丹参，提取物经过微生物降解其中的主要杂质迷迭香酸，然后再采用反相树脂纯化，最终可以得到纯度99％的丹酚酸B。该方法虽然得到的丹酚酸B纯度较高，但是其需要经过一步微生物降解的过程，增加了工艺的步骤。

目前，工业化制备高纯度的丹酚酸B(纯度≥99％，HPLC)仍然相当困难，严重阻碍了丹酚酸B注射剂的开发。因此，本领域的技术人员致力于开发一种操作简单、成本低廉、适用于高纯度丹酚酸B产品的大量制备工艺，以满足注射用制剂原料药的需求。

发明内容

有鉴于现有技术的上述缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供一种从丹参中提取丹酚酸B的操作简单、成本低廉，适用于高纯度丹酚酸B产品的大量制备工艺。

为实现上述目的，发明人经过广泛而深入的研究，意外的发现，使用大孔吸附树脂和微球树脂，经过两步柱层析，能够获得纯度很高的丹酚酸B，而且丹酚酸B的回收率也很高。

具体地，本发明的一种高纯度丹酚酸B的制备方法，包括步骤：

(1)丹参药材的溶剂提取

采用水或者乙醇、甲醇或丙酮水溶液提取丹参药材得提取液；

(2)初步纯化

调节提取液pH1-4，采用，采用甲醇、乙醇或丙酮水溶液洗脱，洗脱液浓缩去除有机溶剂得浓缩液；

(3)精制

将步骤(2)制得的浓缩液调节pH至6-9，采用微球树脂吸附，洗脱剂洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥得精制的丹酚酸B。

优选地，步骤(1)中，提取温度为40-100℃，更优选地提取温度为50-80℃，最优选地提取温度为60-70℃。

优选地，步骤(1)中，采用10％-80％(v/v)的乙醇、甲醇或丙酮水溶液提取丹参药材。更优选地，采用30％-80％(v/v)的乙醇、甲醇或丙酮水溶液提取丹参药材。最优选地，采用40％-70％(v/v)的乙醇、甲醇或丙酮水溶液提取丹参药材。

优选地，步骤(1)中，提取时间为1-10h。更优选地，提取时间为2-8h，最优选地，提取时间为2-6h。

优选地，步骤(1)中，提取过程中维持pH为1-5。更优选地，步骤(1)中，提取过程中维持pH为2-4。最优选地，步骤(1)中，提取过程中维持pH为2.5-3.5。

优选地，步骤(2)中，调节提取液pH2-4，然后再采用大孔吸附树脂进行吸附。

优选地，步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为聚苯乙烯-聚乙烯苯为骨架的低极性吸附树脂。

优选地，步骤(2)中，所述大孔吸附树脂为XAD2、XAD4、XAD16N、XAD16HP、XAD18、XAD1600N、HZ816或HP20树脂。

优选地，步骤(2)中，甲醇、乙醇或丙酮水溶液的浓度为20％-60％(v/v)。更优选地，步骤(2)中，甲醇、乙醇或丙酮水溶液的浓度为30％-55％(v/v)。更最选地，步骤(2)中，甲醇、乙醇或丙酮水溶液的浓度为40％-50％(v/v)。