[发明专利]一种CD3+CD8+CD56+T细胞亚型促进NK细胞增殖的方法

说明书

本发明公开了一种促进NK细胞增殖的方法。本发明提供了CD3⁺CD56⁺T细胞的新用途，为如下三种中的任一种：1)在制备促进NK细胞增殖的产品中的应用；2)在制备促进NK细胞有丝分裂的产品中的应用；3)在制备增强NK细胞抗凋亡能力的产品中的应用。本发明利用CD3⁺CD56⁺T细胞具有促进NK细胞增殖的特性，将CD3⁺CD56⁺T细胞和NK细胞这两类具有强大杀伤功能的免疫细胞共同培养，建立了NK细胞混合培养体系。本发明为NK细胞的体外大量增殖培养提供了新的思路。

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种促进NK细胞增殖的方法。

背景技术

2013年末，SCIENCE杂志评选出十大突破性科学成就中，肿瘤的免疫治疗名列第一。与传统抗肿瘤治疗手段相比，细胞治疗应用范围广泛，尤其对微小转移灶的疗效更是明显，而且其毒副作用要明显低于放化疗。随着肿瘤生物学、分子生物学和免疫学的发展，免疫细胞治疗是目前最有希望取得突破的治疗手段，并已成为继传统肿瘤治疗方法手术和放化疗后的第四种肿瘤治疗模式。目前应用最广泛的工具细胞是T淋巴细胞，但是由于来自肿瘤患者自体的淋巴细胞长期收到肿瘤微环境的免疫编辑，导致其肿瘤识别和杀伤等多方面的低能。如不通过基因修饰技术为T细胞加载特异性识别受体，则很多肿瘤患者无法从该类治疗中获益。也有人常用异体淋巴细胞作为工具细胞为肿瘤患者治疗，但是由于受MHC配型限制，很多患者产生了严重的移植物抗宿主反应(GvHD)。人体中NK细胞被定义为CD3^-CD56⁺淋巴细胞，可以通过识别肿瘤细胞表面发生突变或表达缺失的MHC抗原而激活自体杀伤功能。针对能够表达正常MHC分子的肿瘤细胞，NK细胞还能通过其表面的活化受体进行识别。活化受体包括NKG2D、DN1M-1、NKG2C、2B4和自然细胞毒性受体(NCR：NKp30，NKp44和NKp46)等。尽管近期的研究发现，肿瘤微环境会释放假活化信号，使得NK细胞尚未接触到肿瘤时其抗肿瘤活性已被消耗殆尽。当NK细胞的数量足以克服该影响后，那将会对肿瘤细胞产生强大的杀伤作用。

由于NK细胞数量稀少，仅占外周血淋巴细胞的5％左右，即使经过体外扩增后仍无法获得满意的NK细胞数量用以后期治疗。因此，突破NK细胞治疗瓶颈的关键即是建立高效的体外扩增培养方法。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种CD3⁺CD56⁺T细胞的新用途。

本发明所提供的CD3⁺CD56⁺T细胞的新用途，具体可为如下三种中的任一种：

(1)CD3⁺CD56⁺T细胞在制备促进NK细胞增殖(体外培养)的产品中的应用。

(2)CD3⁺CD56⁺T细胞在制备促进NK细胞有丝分裂的产品中的应用。

(3)CD3⁺CD56⁺T细胞在制备增强NK细胞抗凋亡能力的产品中的应用。

其中，(1)-(3)中，所述NK细胞均为离体的NK细胞。

进一步，所述CD3⁺CD56⁺T细胞具体可为CD3⁺CD8⁺CD56⁺T细胞。

本发明的另一个目的是提供一种促进NK细胞增殖的方法。

本发明所提供的促进NK细胞增殖的方法，具体可包括将CD3⁺CD56⁺T细胞与NK细胞共培养的步骤。