[发明专利]抗喹乙醇和安普霉素的双特异性单克隆抗体及其制备方法在审
申请号: | 201410173591.2 | 申请日: | 2014-04-28 |
公开(公告)号: | CN103951750A | 公开(公告)日: | 2014-07-30 |
发明(设计)人: | 金仁耀;桑永玉 | 申请(专利权)人: | 浙江工商大学 |
主分类号: | C07K16/12 | 分类号: | C07K16/12;C07K16/44;C12N5/20 |
代理公司: | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人: | 吴秉中 |
地址: | 310018 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 乙醇 霉素 特异性 单克隆抗体 及其 制备 方法 | ||
1.一种抗喹乙醇和安普霉素的双特异性单克隆抗体,其特征在于所述的双特异性单克隆抗体对喹乙醇和安普霉素同时具有特异性。
2.一种抗喹乙醇和安普霉素的双特异性单克隆抗体的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)合成喹乙醇和安普霉素的半抗原和人工抗原;
2)利用喹乙醇人工抗原制备分泌抗喹乙醇单克隆抗体的杂交瘤细胞株;
3)利用安普霉素人工抗原制备分泌抗安普霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株;
4)分泌抗喹乙醇抗体的杂交瘤细胞株和分泌抗安普霉素抗体的杂交瘤细胞株进行细胞融合后筛选得到四体杂交瘤细胞,所述的四体杂交瘤细胞分泌抗喹乙醇和安普霉素的双特异性单克隆抗体。
3.如权利要求2所述的抗喹乙醇和安普霉素的双特异性单克隆抗体的制备方法,其特征在于所述的步骤2)中分泌抗喹乙醇单克隆抗体的杂交瘤细胞株通过以下方法制备得到:以琥珀酸喹乙醇为半抗原,合成人工抗原后免疫小鼠,再取脾细胞与SP2/0细胞进行融合、筛选,获得分泌抗喹乙醇抗体的杂交瘤细胞,然后经过含8-杂氮鸟嘌呤或5-溴-2-脱氧尿苷筛选,获得HGPRT酶或者TK酶缺陷的杂交瘤细胞株。
4.如权利要求2所述的抗喹乙醇和安普霉素的双特异性单克隆抗体的制备方法,其特征在于所述的步骤3)中分泌抗安普霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株通过以下方法制备得到:安普霉素活化后为半抗原,EDC法和戊二醛法合成人工抗原后免疫小鼠,再取脾细胞与SP2/0细胞进行融合、筛选,获得分泌抗安普霉素的杂交瘤细胞,然后经过含5-溴-2-脱氧尿苷或8-杂氮鸟嘌呤筛选,获得TK酶或者HGPRT酶缺陷的分泌抗安普霉素的杂交瘤细胞株。
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