[发明专利]细菌纤维素产生菌及利用该菌株发酵细菌纤维素的方法

权利要求书

1.一株细菌纤维素产生菌，其特征在于：该菌为木葡糖酸醋杆菌(Gluconacetobacter xylinus)BC13，于2014年4月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，简称：CCTCC，地址：中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M2014124。

2.权利要求1所述的细菌纤维素产生菌在发酵细菌纤维素中的应用。

3.一种发酵细菌纤维素的方法，其特征在于包含如下步骤：

(1)深层动态发酵

在深层培养器中，对发酵培养基进行加热灭菌，冷却至28～32℃，接入细菌纤维素菌种的摇瓶种子液，接种量为体积百分比0.05％～10％，启动搅拌和通入无菌空气进行动态发酵；

(2)浅层静态发酵

将步骤(1)得到的深层培养器中的发酵液泵送至无菌的浅层培养器内，进行静态发酵，至发酵液表面覆盖一层厚度为2～3mm的凝胶膜；

(3)深层动态与浅层静态交替发酵

①“分别静态发酵和动态发酵”：将步骤(2)中凝胶膜下面的大部分发酵液从浅层培养器泵送至深层培养器内，使浅层培养器中残留发酵液的液位为2～4mm，残留发酵液继续进行静态发酵8～12h；在深层培养器中，将无菌的新鲜发酵培养基添加到发酵液中，添加量为初始动态发酵培养基体积的10％～20％，并用无菌的碱液调节pH至5.5～6.5，然后进行动态发酵8～12h；

②“合并静态发酵”：将步骤①中深层培养器内的发酵液泵送至浅层培养器内与浅层培养器内的发酵液合并，合并发酵液后进行静态发酵8～12h；

③重复步骤①、②，“分别静态发酵和动态发酵”和“合并静态发酵”交替进行，发酵液分开进行发酵累计4～6次；

(4)最后的浅层静态发酵

最后一次合并发酵液，在浅层培养器内继续静态发酵36～60h，即可结束整个发酵过程；

步骤(1)中所述的细菌纤维素菌种为权利要求1所述的木葡糖酸醋杆菌(Gluconacetobacter xylinus)BC13，于2014年4月10日保藏于中国典型培养物保藏中心，简称：CCTCC，地址：中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M2014124。

4.根据权利要求3所述的发酵细菌纤维素的方法，其特征在于：

步骤(1)所述的发酵培养基的初始pH调节至5.0～6.0。

5.根据权利要求3所述的发酵细菌纤维素的方法，其特征在于：

步骤(1)中所述的动态发酵的条件为搅拌转速为100～200rpm，发酵温度为28～32℃，通气量为0.05～0.15L/(min·L发酵液)，发酵时间为12～24h。

6.根据权利要求3所述的发酵细菌纤维素的方法，其特征在于：

步骤(2)中浅层培养器首次装液的液层高度应控制为15～20mm。

7.根据权利要求3所述的发酵细菌纤维素的方法，其特征在于：

步骤(2)中所述的所述的静态发酵的条件为发酵温度为28～32℃，发酵时间为48～60h。

8.根据权利要求3所述的发酵细菌纤维素的方法，其特征在于：

步骤(3)中所述的动态发酵的条件为搅拌转速为100～200rpm，温度为28～32℃，通气量为0.05～0.15L/(min·L发酵液)。

9.根据权利要求3所述的发酵细菌纤维素的方法，其特征在于：

步骤(3)中所述的碱液为氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液，碱液浓度为50～100g/L。

10.根据权利要求3所述的发酵细菌纤维素的方法，其特征在于：

步骤(3)、(4)中所述的静态发酵的温度为28～32℃；

步骤(3)中将深层培养器内的发酵液泵送至浅层培养器时，从浅层培养器底部缓慢进液。