[发明专利]一种茶叶挥发性香气成分分析方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，涉及一种茶叶挥发性香气成分的分析方法，具体涉及了一种同时蒸馏萃取与全二维气相色谱-飞行时间质谱分析茶叶中挥发性香气成分方法。

背景技术

茶叶的独特香气是构成茶叶风味的重要元素，早在上世纪30年代，国外学者就对红茶的香气成分展开研究。随着色谱及质谱技术的进步，目前，报道过的茶叶香气成分累积超过600种。复杂的化学构成是茶叶的独特香气成因的物质基础，而对于同种香气成分，不同浓度下的气味也不尽相同。因此，如果越多的香气成分能被同时定性和定量分析，就可以更深一步了解香气的成因与变化，从而为提高茶叶品质提供技术支持。传统的基于一维气相色谱质谱技术的分析方法，无法同时检测和分析如此多的香气成分。全二维气相色谱-飞行时间质谱技术拥有峰容量大，分辨率高，分析速度快和族分离的特点，在复杂体系分离分析中有着一维技术无法比拟的优势。另外绝大部分香气成分的含量较低，不易直接检测，需要富集浓缩。同时蒸馏萃取技术结合了水蒸气蒸馏与有机溶剂萃取两种方法的优点，使用少量样品就可以得到足量香气成分，同时操作简便，重复性好。

发明内容

本发明要解决的问题：鉴于传统一维技术峰容量小及分辨率低的问题，本发明提供了一种同时蒸馏萃取结合全二维气相色谱-飞行时间质谱分析的茶叶内香气成分分析方法，可以同时检测上百种有效化学成分。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案。

(1)使用同时蒸馏萃取方法提取挥发性成分。将5-20g茶叶样品粉末、0.1-0.3mg联苯(内标)及200-400ml水放入第一个烧瓶中，将50-70ml二氯甲烷放入第二个烧瓶中，连接同时蒸馏萃取装置，两个烧瓶分别加热，回流提取1-3h，然后收集第二个烧瓶中样本，加无水硫酸钠除水，而后在旋蒸仪中浓缩至1-2ml，而后储存待分析。

(2)使用全二维气相色谱-飞行时间质谱来分析制得样品。

(3)针对全二维气相色谱-飞行时间质谱分析的原始数据，通过Pegasus4D软件色谱峰识别及色谱峰定性，然后通过内标半定量分析各种挥发性香气成分。其中用于峰识别的信噪比设为50。

本发明中，全二维气相色谱-飞行时间质谱由LECO公司提供；其中第一维色谱柱为DB-5MS，规格为30m×250μm×0.25μm。其中第二维色谱柱为RTX-200MS，规格为1.6m×180μm×0.20μm。

使用内标为联苯，在样本提取前加入0.1-0.3mg于第一烧瓶中。

本发明中，全二维气相色谱-飞行时间质谱条件：第一维柱温箱初始温度：60℃；第一维程序升温：60℃保持3min，然后以7℃/min升温至290℃并保持5min；第二维柱温箱初始温度：70℃；第二维程序升温：70℃保持3min，然后7℃/min升温至300℃并保持5min；恒压模式：进样口压力，200kPa；进样口温度：280℃；进样模式：分流，分流比10：1；溶剂切割时间：2min；调制周期：5s；离子源：EI，能量70eV；离子源温度：220℃；传输线温度；270℃；质核比范围：33-600；采集频率：50Hz；检测电压：1.6kV。

本发明对于现有技术达到有益效果。

本方法与其它方法比较，使用全二维气相色谱-飞行时间质谱对香气成分分析，可以同时分离检测上百种化合物，结合飞行时间质谱的高分辨率特点，通过质谱正、反相似度度筛查，提高定性准确度。该方法通过方法学检验，重复性好。用于三类茶叶香气成分分析，找到多种化合物在不同茶叶中的含量存在显著性差异。

具体实施例

通过下属实施例有助于理解本发明，但不限制本发明内容。

实施例1：方法重复性考察

为考察整体方法的重复性，实验步骤如下

(1)使用同时蒸馏萃取方法提取挥发性成分。将15g茶叶样品粉末、0.1mg联苯(内标)及300ml水放入第一烧瓶中，将60ml二氯甲烷放入第二烧瓶中，连接同时蒸馏萃取装置，两个烧瓶分别加热，回流提取2h，然后收集第二烧瓶中样本，加1g无水硫酸钠除水，而后在旋蒸仪中浓缩至1ml，而后储存待分析。共有11个相同样本被提取。