[发明专利]内毒素的检测和/或定量

说明书

发明背景

细菌内毒素可以从革兰氏阴性菌产生、分泌和/或释放。细菌内毒素会污染很多材料，诸如水、食物、药品和胃肠外制品。细菌内毒素可能会很危险，有时对人类来说是致命的。在众多工业中，药品、医疗装置、食品和饮料工业的制造商必须满足标准，以证明他们的产品没有包含可能有损接受者或消费者健康的水平的污染物。例如，一些药品和医疗装置的制造商可能不得不保证他们的产品没有可检测水平的革兰氏阴性菌内毒素。另外，为了迅速地开始对可能感染革兰氏阴性菌的患者进行适当医疗治疗，重要的是尽可能早地确定是否存在内毒素，并且如果可能，还应确定患者体内内毒素的浓度。

典型的用于内毒素的检验使用鲎阿米巴样细胞溶解物(LAL)，其中将LAL暴露于内毒素，导致产生一种产物的凝结级联，对该产物通过凝胶法(Gel-clot assay)、终点浊度分析法、动态比浊法或终点显色法来进行分析。

然而，还需要用于检测内毒素的存在和/或浓度的改进的方法和系统。

发明简述

本发明的一个实施方案提供了一种用于检验样本内毒素的方法，所述方法包括：(a)将待检验样本与LAL试剂接触，其中如果样本中存在内毒素的话，则内毒素与试剂反应，形成凝结产物；(b)用光纤顶部接触所述样本，其中如果存在凝结产物的话，所述凝结产物形成于光纤的顶部和/或与光纤顶部结合，其中所述光纤顶部具有光学厚度，当凝结产物形成和/或结合于光纤顶部时，所述光学厚度从初始厚度增加；(c)测定在接触样本后的所述光纤顶部的光学厚度，其中光学厚度从初始厚度增加表明存在内毒素，光学厚度没有增加表明不存在内毒素。在一些实施方案中，所述方法包括测定样本中的内毒素浓度。

在一些实施方案中，所述方法包括接触多个光纤顶部，并在接触样本后测定所述多个光纤顶部的光学厚度。在包括多个光纤的所述方法的那些实施方案中，这些光纤可以被单个使用和/或被安排成束。

在另一个实施方案中，提供了用于检验样本内毒素的试剂盒，所述试剂盒包括具有光纤的生物传感器和LAL试剂，所述光纤具有顶部。

在另一个实施方案中，提供了用于分析样本内毒素的试剂盒，所述试剂盒包括外壳，该外壳包括基座和盖罩，所述基座包括槽和具有侧壁的反应室，该反应室具有穿通所述侧壁的孔，该孔与所述槽相通；盖罩包括样本接收室和突出物，该突出物包括侧壁和至少一个通过突出物侧壁的孔，其中所述盖罩可拆卸地与基座接合。在更优选的实施方案中，所述反应室中具有LAL试剂，和/或光纤被安排在基座的槽中，其中所述光纤顶部通过所述孔与反应室相通。

根据本发明另一个实施方案，用于检验样本内毒素的试剂盒包括具有光纤的生物传感器、LAL试剂和外壳，所述光纤具有顶部，所述外壳包括基座和盖罩，所述基座包括槽和具有侧壁的反应室，该反应室具有通过所述侧壁的孔，所述孔与槽相通；盖罩包括样本接收室和突出物，突出物包括侧壁和至少一个通过所述突出物侧壁的孔，其中所述盖罩可拆卸地与所述基座接合，所述反应室中具有LAL试剂，所述光纤被安排在所述基座的槽内，其中光纤顶部通过孔与反应室相通。

附图的几个视图的简述

图1A和1B显示了适合用于根据本发明实施方案的检验的光学组件。

图2显示了在根据本发明实施方案的检验中不同内毒素浓度的剂量响应。

图3显示了在根据本发明实施方案的使用不同生物传感器和不同样本室的检验中不同内毒素浓度的剂量响应。图3A和3B显示了分别具有聚苯乙烯样本室和聚丙烯样本室的氨丙基甲硅烷(APS)官能化的生物传感器；图3C和3D显示了分别具有聚苯乙烯样本室和聚丙烯样本室的SiO₂官能化的生物传感器。

图4显示了根据本发明实施方案，在包括振摇样本(图4A)和不振摇样本(图4B)的检验中具有不同内毒素浓度的剂量响应。

图5显示了根据本发明实施方案的试剂盒，示出了包括基座和盖罩的外壳，所述基座包括槽和具有侧壁的反应室，所述室具有通过侧壁的孔；所述盖罩包括样本接收室和突出物，所述突出物包括侧壁和至少一个通过突出物侧壁的孔，其中所述盖罩可拆卸地与所述基座接合。图5A显示了透视图和局部分解图，图5B和5C分别示出了基座的顶视图和前视图，还示出了安排在基座的槽内的具有顶部的光纤，其中所述顶部通过孔与所述反应室相通。

发明详述