[发明专利]一株产β-果糖苷酶的米曲霉菌株及其培养方法与应用

权利要求书

1.一株米曲霉(Aspergillus oryzae)FS4菌株，2014年4月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.9087，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

2.权利要求1所述米曲霉(Aspergillus oryzae)FS4菌株的培养方法，其特征在于，步骤如下：

挑取米曲霉FS4菌株接种至斜面培养基活化48～60小时，活化温度为25～30℃，取活化后的米曲霉FS4接种于种子培养液中，培养48～60小时，培养温度为25～30℃，即得；

所述斜面培养基组分如下：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，琼脂15g/L；

所述种子培养液组分如下，均为质量百分比：蔗糖0.5～4％，酵母粉1～4％，羧甲基纤维素钠0.01～0.7％，余量水。

3.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述种子培养液组分如下，均为质量百分比：蔗糖2％，酵母粉3.5％，羧甲基纤维素钠0.5％，余量水。

4.权利要求1所述米曲霉(Aspergillus oryzae)FS4在生产levan型低聚果糖中的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，步骤如下：

(1)取经上述培养后的米曲霉FS4，按体积百分比1～5％的接种量转接于产酶发酵培养液中，摇床培养48～72小时，培养温度为25～30℃，摇床转速为150转/分，制得发酵液；

所述产酶发酵培养液组分如下，均为重量百分比：蔗糖0.5～4％，酵母粉1～4％，羧甲基纤维素钠0.01～0.7％，余量水；

(2)将步骤(1)制得的发酵液经固液分离，取沉淀，制得菌丝体；

(3)将步骤(2)制得的菌丝体经破碎后，按质量体积比1：(1～10)悬浮于反应缓冲液中，单位g/mL，50～100r/min搅拌1～3min，制得粗酶液；

(4)将步骤(3)制得的粗酶液与质量浓度为20～70％的蔗糖溶液按体积比1:(1～4)混合，在温度为30～60℃的条件下，反应10～400分钟，制得含有levan型低聚果糖的溶液。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述步骤(1)中的产酶发酵培养液组分如下：蔗糖2％，酵母粉3.5％，羧甲基纤维素钠0.5％，余量水。

7.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述步骤(2)中的固液分离为抽滤或离心。

8.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述步骤(3)中的破碎为用液氮研磨破碎。

9.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述步骤(4)中反应缓冲液为pH7.0、浓度50mM的磷酸钾缓冲液；所述步骤(4)中蔗糖溶液质量浓度为60％。

10.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述步骤(5)中反应温度为45℃，反应时间为300分钟。