[发明专利]子组生物单元的选择性释放有效

专利信息
申请号: 201410177875.9 申请日: 2014-04-29
公开(公告)号: CN104130968B 公开(公告)日: 2020-02-07
发明(设计)人: J.布兰德-梅尔;C.彻鲁比尼;A.德雷克斯勒;N.格沃德;M.科普;E.奥斯特布罗克;E.萨罗菲姆 申请(专利权)人: 霍夫曼-拉罗奇有限公司
主分类号: C12N5/00 分类号: C12N5/00
代理公司: 11494 北京坤瑞律师事务所 代理人: 封新琴
地址: 瑞士*** 国省代码: 瑞士;CH
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摘要:
搜索关键词: 生物 单元 选择性 释放
【说明书】:

提供了一种从包括在异质组生物单元中的子组生物单元的实体一个或多个成员单独释放的方法。该方法包括通过连接体将包括所述子组生物单元的所述组生物单元结合至所述实体。结合之后,确定在所述实体上的所述一个或多个成员的位置。一旦位置被确定,则就将局部物理脉冲施加至所述一个或多个成员。通过分离连接体,局部物理脉冲将一个或多个成员从实体单独释放。

技术领域

发明涉及一种从包括在异质组生物单元中的子组生物单元的实体一个或多个成员单独释放的方法、一种通过检测从受试者获得的子组生物单元来检测所述受试者疾病的方法、以及一种将子组生物单元的一个或多个成员从一组生物单元中分离的方法。

背景技术

用于分析细胞生物学的现代技术已经创建了日益增加的制备由同质群体细胞或者检测或分离单个细胞或者小颗粒构成的样品的需求。基因组和蛋白质组的研究、遗传克隆、干细胞研究、以及基于细胞的筛选都将从增强的能力中获益,以获得单个细胞或小同质生物样品用于随后的分析。这些样品包括各种分子,比如DNA或RNA以及细胞或生物体。

在从混合群体中选择细胞的情况下,必须分析具有所需特征的各个细胞,之后识别和分离所需的子群。用于哺乳动物细胞的标准分类方法需要细胞分散在单细胞悬浮液中,并且采用以此方式自然生长的造血细胞是最成功的。这些方法不太适用于贴壁细胞,目前最常见的细胞表型。

通常,通过将贴壁细胞电镀在生长表面上然后使用显微镜寻找它们而对它们进行分析。用于将所关注的细胞与混合群体细胞分离的传统分选技术通常需要将贴壁细胞从它们的不利于细胞健康的生长表面酶或机械释放,或者涉及用于基于有限稀释或对选择性环境的基因工程抗性的选择的扩展协议。

分离提供适于下游分析的完好细胞或颗粒的异质群体的单个细胞或颗粒或其中的低数量的有效方法仍不见踪影。

发明内容

本发明提供了用于将适于下游分析和诊断的单细胞或颗粒分离的新方法。

提供了一种从包括在异质组生物单元中的子组生物单元的实体一个或多个成员单独释放的方法。该方法包括通过连接体将包括所述子组生物单元的所述组生物单元结合至所述实体。结合之后,确定在所述实体上的所述一个或多个成员的位置。一旦位置被确定,则就将局部物理脉冲施加至所述一个或多个成员。通过分离连接体,局部物理脉冲将一个或多个成员从实体单独释放。

一种通过检测从受试者获得的子组生物单元来检测所述受试者疾病的方法,其中,所述子组生物单元是表示此外所提供的疾病。该方法包括提供包含至少一个子组生物单元的异质组生物单元,该组生物单元从受试者获得,且该组生物单元中的每个成员通过连接体被结合至实体,最好是固体支承。确定在实体上的子组生物单元的位置。然后,将局部物理脉冲施加至所述一个或多个成员。通过分离连接体,局部物理脉冲将一个或多个成员从实体单独释放。然后收获子组生物单元的一个或多个成员。通过收获子组生物单元的一个或多个成员,分离子组生物单元的一个或多个成员。然后对于存在表示该疾病的至少一个标记,分析所收获的一个或多个成员。

公开了一种将子组生物单元的一个或多个成员从一组生物单元中分离的方法。该方法包括:

提供包括至少一个子组生物单元的异质组生物单元,该组生物单元中的每个成员通过连接体被结合至实体,最好是固体支承;以及

确定子组生物单元的所述一个或多个成员的位置;

将局部物理脉冲施加至所述一个或多个成员,其中,通过分离所述连接体,所述局部物理脉冲将所述一个或多个成员从所述实体单独释放;

分离子组生物单元的所释放的一个或多个成员。

具体实施方式

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