[发明专利]从辣木叶中提取辣木黄酮的方法

说明书

技术领域

本发明属于天然产物分离提纯领域，涉及辣木中生物活性物质黄酮的提取方法，涉及到亚临界提取技术，是一种精细分离辣木中生物活性物质的方法。 

背景技术

辣木(Moringa oleifera Lam),属白花菜目辣木科,又称鼓槌树、不死树等，原产于北印度亚喜马拉雅区域及非洲,广泛分布在印度、巴基斯坦等国。辣木营养丰富，辣木树所含的钙质是牛奶的四倍，钾是香蕉的三倍，铁是菠菜的三倍，维他命C是柑桔的七倍，维他命A是胡萝卜的四倍。辣木叶片、果荚含有的多种矿物质、维生素等营养物质,使其作为食品食用有食疗保健的功能,也可用于医药、保健、工业等方面,被誉为“神奇之树”、“生命之树”。辣木树是近年来在欧美新兴的一种保健植物(食品)，号称高钙、高蛋白质、高纤维、低脂质，并且具有增强体力、治疗贫血、抑制病菌、驱除寄生虫等功效。 

黄酮类物质，作为生物活性物质的重要类别，在辣木的食用、药用价值中起到了至关重要的作用。黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环通过中央三碳原子相互连结而成的一系列化合物，其基本母核为2-苯基色原酮。它是一种很强的抗氧剂，可有效清除体内的氧自由基，阻止细胞的退化、衰老，也可阻止癌症的发生。从辣木中提取、分离生物活性物质的方法，目前广泛使用的是溶剂提取法。此种方法将辣木叶片干燥粉碎，然后使用有机溶剂室温或加热回流提取，减压浓缩，得到生物活性物质富集的浓缩萃取液。传统方法提取天然产物中的生物活性成分是一件耗时耗能又耗费溶剂的工作，同时还存在被提取成分损失大、操作周期长、能耗高、操作不便、提取率不高等缺点，已不能适应现代化生产的需要，特别是在现代化中草药有效成分的提取过程中这些缺点日渐显现，造成了人力、物力资源的极大浪费。 

亚临界流体是指某些化合物在温度高于其沸点但低于临界温度，且压力低于其临界压力的条件下，以流体形式存在的该物质。亚临界流体具有近似超临界流体的浸润性和扩散性，却没有那么严苛的温度和压力要求。选择合适的物质，可以在较低温度和压力下操作。这些性质均有利于从天然产物中提取生物活性物质。 

亚临界流体萃取(Sub-critical Fluid Extraction)技术，是利用亚临界流体作为萃取剂，在密闭、无氧、低压的压力容器内，根据有机物相似相溶的原理，通过物料与萃取剂在浸泡过程中的扩散作用，达到固体物料中的目标成分扩散转移到萃取剂中，再通过减压蒸发的过程将萃取剂与目的产物分离，最终得到目的产物的一种新型萃取与分离技术。1939年，美国的Henry Rosenthal首创将压缩后液化的低级气态烷烃用于油料浸出，成为亚临界萃取方法的雏形。 

使用亚临界流体萃取技术相比传统溶剂加热回流提取的方法具有以下优点：提取速度快，提取效率高，对比孙鸣燕和王羽梅等研究所使用的乙醇回流提取法(提取三次，每次提取的时间1.5小时)，亚临界流体萃取技术可以缩短提取时间2倍以上；溶剂消耗量少，97％以上的溶剂可以回收循环使用；浸出液浓度高，大大减少了后期处理的成本；提取温度不高，适用于是热敏性物料提取；生产连续性好，应能适于现代化大规模连续性生产；节约能源，安全可靠；结构简单，操作方便。 

专利号为200910094239.9的中国专利公开了一种从辣木种子中提取拉姆蛋白质的方法，该方法为：将辣木籽粉与水混匀，加入酶，并水浴12-48小时，调PH＝7-9值后，离心，取上层清液；再次调上清液PH＝10-12后，弃上清液，去沉淀。干燥后即为辣木蛋白质。该方法简便，易操作。但是并没有涉及到辣木中黄酮等生物活性物质的提取。 

发明内容

本发明的目的是提供一种高效提取辣木中黄酮类生物活性物质方法。使用亚临界流体萃取的方法，操作简单，可以缩短提取时间、减少溶剂用量、降低能耗，同时可以提高提取物收率和纯度。 

本发明的技术方案如下： 

从辣木叶中提取辣木黄酮的方法，步骤如下： 

1)将辣木叶片干燥、粉碎，装入滤筐中，投入亚临界萃取釜中，密闭萃取釜，调节萃取釜内真空度至0.06～0.1Mpa；然后加入有机萃取剂，调节固液比1:5～20(g/ml),升温至亚临界萃取釜中萃取液处于亚临界状态，萃取回收溶剂，得到黑绿色浸膏； 

2)向黑绿色浸膏中加入5倍浸膏质量的用水饱和的正丁醇萃取；使用离心机离心，收集萃取相；将萃取相用旋转蒸发仪在真空度为0.01～0.1Mpa时，减压浓缩至棕黄色浸膏； 

3)将2)所得棕黄色浸膏上大孔树脂柱，然后用洗脱液按洗脱液的极性由小到大，梯度洗脱，检测，取黄酮含量大于97％的馏分浓缩至干粉。