[发明专利]番鸭呼肠孤病毒通用型RT-PCR检测引物及检测方法有效
| 申请号： | 201410178463.7 | 申请日： | 2014-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN103966359A | 公开（公告）日： | 2014-08-06 |
| 发明（设计）人： | 叶伟成;余斌;张存;云涛;陈柳;倪征;华炯钢 | 申请（专利权）人： | 浙江省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 胡红娟 |
| 地址： | 310021 *** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 番鸭呼肠孤 病毒 通用型 rt pcr 检测 引物 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一对引物，其特征在于：
上游引物：5’-CACAGTGCTACCATC-3’；
下游引物：5’-CTGCTGATCATAATT-3’。
2.一种包含权利要求1所述引物的RT-PCR试剂盒。
3.如权利要求2所述的RT-PCR试剂盒在检测番鸭呼肠孤病毒中的应用。
4.一种检测番鸭呼肠孤病毒的方法，其特征在于，利用待检测样品的RNA和权利要求1所述的引物进行RT-PCR扩增，如果扩增产物包含436bp的片段，则待测样品包含番鸭呼肠孤病毒。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述RT-PCR扩增的反应体系为：
无RNA酶的蒸馏水补足体系至25.0μL。
6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，RT-PCR的反应条件为：
(1)50℃30min；
(2)预变性：95℃4min；
(3)变性：94℃45s；退火：56℃45s；延伸：72℃45s；共进行30次循环；
(4)延伸：72℃10min。
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