[发明专利]玉米耐盐性鉴定方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物生理学，具体地说，涉及一种玉米耐盐性鉴定方法。

背景技术

土壤盐渍化作为主要的非生物胁迫，严重影响世界农作物产量。全世界盐渍土的全球总面积830万公顷，其中约20％属于灌溉农田，而且盐渍化有进一步加剧的趋势。随着世界总人口不断增长，特别是在部分欠发达的国家和一些新兴工业化国家，人口增长和可用耕地面积减少的矛盾日益加剧。因此，农作物耐盐性改良显得尤为重要。

盐碱对作物的影响主要有：渗透胁迫、离子毒害以及离子代谢失调。在盐渍化的土壤中，植物通过根系中水分流吸收Na⁺、K⁺等盐离子，这些离子通过协同运输输送到植物各个组织，细胞内高浓度的离子造成细胞膜内外渗透压差，同时过多的钠离子及氯离子造成细胞毒害及钠离子、钾离子亲和替换，植物就会表现出萎蔫和生物干旱，最后导致生物产量和经济产量下降。在自然界中，存在各种非生物逆境胁迫，而植物在长期进化过程中形成一套特殊的耐盐机制，包括外排泌盐、盐离子区室化、阻滞运输等。而对于一个物种来讲，由于其遗传进化的差异，个体在耐盐性方面都具有一定的遗传差异，这些遗传差异外在表现就是与生理生化相关的参数变异。因此，选择一套可靠的可重复的便捷的耐盐性鉴定方法，对于农作物抗逆育种具有重要意义。

玉米作为全世界第一大粮食作物，对世界粮食安全具有重要意义，而玉米又是一个对盐敏感的作物，玉米一旦受到盐胁迫后，表现出叶片萎蔫，叶片顶尖白化，植株发育迟缓，生物产量下降，最后导致严重减产。近年来，玉米育种迅速发展，其抗逆性受到更加重视，而国内对于玉米耐盐性研究还相对较少，因此建立一套玉米耐盐性鉴定可靠方法具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种快速、精准鉴定玉米耐盐性的方法。

为了实现本发明目的，本发明的一种玉米耐盐性鉴定方法，包括以下步骤：

1)将玉米种子在发芽纸上发芽，选取萌发一致的幼苗；

2)将幼苗移栽入装有蛭石的花盆中，在二叶期之前浇灌1/2浓度的Hoagland营养液；

3)幼苗在二叶期之后，对照组植株继续浇灌1/2浓度的Hoagland营养液，处理组植株分别浇灌100mM和200mM的NaCl盐溶液，隔日浇一次，直至植株材料出现萎蔫表型；

4)植株出现萎蔫表型后，取幼苗地上部分称重，再置于85-160℃(优选85℃)烘箱中干燥36-48小时(优选48小时)，再次称重，将烘干的材料置于材料10倍体积的消化液中处理8-12小时(优选12小时)，再将消化液置于马沸炉中于175-185℃加热2-3小时，直至溶液变为清澈透明，将以上溶液稀释后，在原子吸收光谱仪上测定Na⁺、K⁺的离子含量。所述消化液为HNO₃和HClO₄按4:1体积比混合配制。

其中，步骤2)和3)的培养条件为：25℃光照16小时，光照强度为450μmolm^-2s^-1，23℃黑暗8小时，相对湿度65％。

具体地，本发明的米耐盐性鉴定方法包括以下步骤：

1)材料准备：收集不同玉米材料的种子，每个材料3个处理，每个处理3个重复，每个重复种植4株，用去离子水冲洗后，置于发芽纸上，28℃发芽48小时。

2)幼苗移栽及培养：将萌发一致的种子移栽到装有蛭石的小花盆中，待全部幼苗播种完毕，将花盆放置在培养箱中，培养条件为：25℃光照16小时，光照强度为450μmolm^-2s^-1，23℃黑暗8小时，相对湿度65％。二叶期之前幼苗浇灌1/2浓度的Hoagland营养液(Hoagland&Arnon,1950)。

3)盐胁迫处理：待到幼苗第二叶片平展后，对照组植株浇灌Hoagland营养液，胁迫处理组的幼苗则分别浇灌100mM和200mM NaCl溶液，隔日浇一次，直至植株材料出现萎蔫表型。

4)样品处理：大约4周后，敏感型材料出现萎蔫表型，将所有材料从小花盆中取出，分别称取地上部分鲜重，然后将这些材料置于85℃烘箱中干燥48小时，再称量材料干重。