[发明专利]一种利用酒精工业黄水生产乳酸菌的方法在审
申请号: | 201410183608.2 | 申请日: | 2014-05-04 |
公开(公告)号: | CN104004675A | 公开(公告)日: | 2014-08-27 |
发明(设计)人: | 何万领;张广勤;李旺;丁轲;李元晓;李晓丽 | 申请(专利权)人: | 河南科技大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 洛阳公信知识产权事务所(普通合伙) 41120 | 代理人: | 罗民健 |
地址: | 471000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 酒精 工业 水生 乳酸菌 方法 | ||
1.一种利用酒精工业黄水生产乳酸菌的方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)将收集到的酒精工业黄水进行过滤,并取其滤液备用;
(2)对步骤(1)所得的酒精工业黄水滤液进行营养成分的测定,并根据测定结果对酒精工业黄水滤液进行营养补充,备用;
(3)对步骤(2)中经营养补充后的酒精工业黄水滤液进行灭菌,并将灭菌后的酒精工业黄水滤液的pH调节至6.3~6.5,备用;
(4)将乳酸菌菌种接种于MRS液体培养基上,并培养至对数生长中后期,检测活菌数不低于1×108 cfu/mL时作为种子菌液备用;
(5)按照5%(v/v)的比例将步骤(4)所得的的种子菌液接种于步骤(3)所得的酒精工业黄水滤液中,并于37~37.5℃的条件下培养24~30h;
(6)按照重量体积比向步骤(5)中经培养的乳酸菌中添加2%的熟米粉,并于室温下静置5min-10min,然后通过离心得到乳酸菌固体混合物,备用;
(7)将步骤(6)中所得的乳酸菌固体混合物摊成0.3~0.5cm的厚度,置于真空冷冻干燥机内进行干燥,干燥完成后进行真空包装,得到乳酸菌成品。
2.根据权利要求1所述的一种利用酒精工业黄水生产乳酸菌的方法,其特征在于:步骤(1)中的酒精工业黄水是从板框压滤机的板框中收集得到。
3.根据权利要求2所述的一种利用酒精工业黄水生产乳酸菌的方法,其特征在于:步骤(3)中的灭菌方法是先将补充营养后的酒精工业黄水滤液的pH调节至3.2~3.5,然后向盛装酒精工业黄水滤液的容器内注入二氧化碳气体,密封并室温放置24h。
4.根据权利要求3所述的一种利用酒精工业黄水生产乳酸菌的方法,其特征在于:步骤(4)中的MRS液体培养基的制备方法是:取牛肉蛋白粉10g、牛肉浸膏10g、酵母浸膏5g、葡萄糖20g 、醋酸钠5g、柠檬酸二铵2g、吐温80 0.1mL、硫酸镁0.58g、硫酸锰0. 28g和蒸溜水1000mL混合,并用高压灭菌锅在121℃灭菌20min-30min,然后调节pH至6.3~6.5。
5.根据权利要求4所述的一种利用酒精工业黄水生产乳酸菌的方法,其特征在于:在进行步骤(7)之前,根据步骤(6)中所得的乳酸菌固体混合物的重量,按照重量比向乳酸菌固体混合物中加入2.5%~3%海藻酸钠、4.5%~5%的脱脂奶粉、5%甘油和8%~10%的β-环状糊精作为保护剂,并混合均匀。
6.根据权利要求5所述的一种利用酒精工业黄水生产乳酸菌的方法,其特征在于:步骤(7)中所述的真空冷冻干燥机的温度是-45℃~-50℃,真空度10~20Pa,干燥时间22~24h。
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