[发明专利]miR-509-3p表达抑制剂在制备治疗多囊卵巢综合征药物中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及miR-509-3p表达抑制剂在制备治疗PCOS药物中的应用。 

背景技术

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄妇女常见的内分泌紊乱性疾病，主要特征是排卵障碍，其发病率占女性的6.6～8.0％。70余年来，一直是国内外生殖内分泌学者关注的疾病之一。2003年ESHRE/ASRM在荷兰鹿特丹制定了PCOS的诊断标准：①无排卵或稀发排卵；②高雄激素血症的临床和生化特征；③超声检查见卵巢多囊样改变，并排除其他雄激素过多相关疾病，如先天性肾上腺皮质增生症(CAH)、库欣综合征、高泌乳素血症、严重的胰岛素抵抗综合征、分泌雄激素的肿瘤和(或)甲状腺功能异常等。按照这一标准我们对山东省烟台市育龄妇女进行流行病学调查，发现烟台PCOS的发病率为7.2％，PCOS伴不孕的发生率为9.38％，且发病率有逐渐上升的趋势。 

miRNA在基因调控网络中发挥的作用逐渐被揭示，成熟的miRNA通过与靶标mRNA进行完全或不完全互补配对，引起靶标mRNA的降解或翻译抑制，达到调控目的基因表达的作用，从而在发育、细胞增殖、凋亡、分化及肿瘤的发生等过程中起重要作用。有关小鼠miRNA的研究表明，miRNAs的异常表达可能与卵子发育异常和受精失败有关。Assou S.和Moussaddykine S.等对非PCOS患者MII卵子和颗粒细胞miRNA研究的报道，认为miR-30，miR-103和miR-16可能在卵子成熟中起作用，而且发现let-7miRNA家族成 员仅在颗粒细胞中表达，与血管生成有关，可作为biomarker预测妊娠结局。最近的研究表明，PCOS患者卵泡液中miRNAs对其靶基因的调控与PCOS的致病相关。然而，目前尚未见关于PCOS患者颗粒细胞miRNAs的相关研究。 

发明内容

为了解决上述问题，本发明采用基因芯片技术分离了PCOS患者卵巢颗粒细胞中的差异miRNAs，其中miR-509-3p调控前列腺素内过氧化物合成酶(PTGS1)的表达，从而影响到PCOS患者的排卵过程，并提供miR-509-3p表达抑制剂在制备治疗PCOS排卵药物中的应用。 

其中，所述的所述的miR-509-3p表达抑制剂优选为miR-509-3p反义单链寡核苷酸和/或miR-509-3p-sponge。 

本发明中，miR-509-3p的登录号为MIMAT0000459(http://www.miRbase.org)。 

miR-509-3p反义单链寡核苷酸可人工合成或直接市售获得；miR-509-3p海绵(miR-7-sponge)可根据小RNA sponge技术构建。 

进一步的，所述的miR-509-3p反义单链寡核苷酸还可经PNA、LNA或2-Ome修饰。 

在本发明优选的实施方案中，所述的miR-509-3p表达抑制剂为Anti-miR^TM miR-509-3p Inhibitor，购自Ambion公司。 

本发明还提供含有miR-509-3p表达抑制剂的PCOS治疗药物。 

其中，所述的miR-509-3p表达抑制剂优选为miR-509-3p反义单链寡核苷酸和/或miR-509-3p-sponge。 

进一步的，所述的所述的miR-509-3p反义单链寡核苷酸还可经PNA、LNA或2-Ome修饰。 

在本发明优选的实施方案中，所述的miR-509-3p表达抑制剂为Anti-miR^TM miR-509-3pInhibitor，购自Ambion公司。 

采用基因芯片技术筛选PCOS患者和正常妇女卵巢颗粒细胞中差异表达的miRNAs，共筛选到差异表达的miRNAs17个，包括miR-1273e,miR-135b-5p,miR-152,miR-193a-3p,miR-194-5p,miR-196a-5p,miR-200b-3p,miR-423-3p,miR-454-3p,miR-455-5p,miR-4659a-3p,miR-509-3-5p,miR-509-3p,miR-513b,miR-652-5p,miR-95,miR-H1。