[发明专利]一株短波单胞菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物，具体涉及一株短波单胞菌及其应用。

背景技术

大量的富含营养物质工农业和生活污水排放进入自然水体，导致水体富营养化状况日趋严重。作为水体富营养化的重要表征之一，藻类水华的爆发频率与面积在世界范围内呈现逐年递增趋势，给许多国家造成了非常严重的环境影响和经济损失，引起了各国政府和人民的广泛关注。在中国，许多淡水湖泊(如太湖、滇池、巢湖等)都受到蓝藻水华的严重影响。因此，有效地控制蓝藻水华显得非常必要。

目前，控制蓝藻水华的方法主要有物理方法、化学方法和生物方法。物理方法主要有人工捕捞、机械除藻等。化学方法主要包括加入杀藻化学物质硫酸铜、除草剂等。但是，物理和化学方法由于高成本、二次污染以及对淡水生态系统的潜在危害从而限制了其有效使用。因此，生物方法因其高效性、专一性以及环境友好等优点而受到越来越多的关注。

溶藻细菌是一类能杀死藻类细胞的细菌的总称，由于其能有效地杀死造成蓝藻水华中的蓝藻，故被广泛认为可应用于蓝藻水华的控制。因此，从自然水体中筛选出具有抑制甚至灭杀蓝藻水华中优势藻株的溶藻细菌，对于开发新型杀藻剂具有重要的实践价值，最终可应用于控制蓝藻水华。

发明内容

本发明的目的，就是为了提供一株具有溶藻活性的短波单胞菌，用于新型杀藻剂的开发和生产，最终应用于控制蓝藻水华。

本发明涉及的短波单胞菌，拉丁文名为：Brevundimonas sp.，该菌株为革兰氏阴性菌，杆状菌体，大小为0.4-0.5×1-2μm。该菌株专性需氧，化能异养。在牛肉膏蛋白胨培养基平板上菌落为光滑、圆形和白色，中等大小。最适生长pH为6.0-8.0，最适生长温度为25-30℃，4℃下不生长。经16S rRNA基因序列分析和同源性比较，其与某短波单胞菌菌株有99％的同源性，故鉴定为短波单胞菌属细菌，命名为短波单胞菌J4，此菌的16S rRNA基因序列在GenBank中的登录号为KC429672。

本发明提供的短波单胞菌J4保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号CGMCC NO.8976，保藏日期2014年3月28日。保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院中科院微生物研究所，邮编：100101电话：86-10-64807596。

本发明的技术方案是：一株短波单胞菌(Brevundimonas sp.)，命名为短波单胞菌J4，保藏号为CGMCC NO.8976。

上述短波单胞菌J4用于控制蓝藻水华。

上述应用，是通过将短波单胞菌J4接种于pH7.0的灭菌牛肉膏蛋白胨培养基(3g/L牛肉膏；10g/L蛋白胨；5g/L氯化钠)，在30℃、200rpm条件下培养24h得到其发酵液，应用于溶藻。

上述应用，是通过将短波单胞菌J4的发酵液先经过12000g离心20min后再用0.22μm孔径的微孔滤膜过滤后得到J4的无菌发酵液，应用于溶藻。

上述应用，是将短波单胞菌J4的无菌发酵液经过旋转蒸发仪干燥再用甲醇萃取后得到其萃取物，应用于溶藻。

本发明的主要效果及优点：

1、菌种筛选方法简单，可重复性高。筛选得到的短波单胞菌J4对太湖、滇池等蓝藻水华中的优势藻株铜绿微囊藻具有很强的溶藻效果。

2、短波单胞菌的无菌发酵液、高温处理后的无菌发酵液对铜绿微囊藻也具有很强的溶藻效果。此外，短波单胞菌J4无菌发酵液的甲醇萃取物在0.05mg/mL浓度下对铜绿微囊藻9110具有很强的溶藻效果。

3、短波单胞菌J4及其甲醇萃取物均具有很强的溶藻效果，对环境友好，不会造成二次污染，可用于新型杀藻剂的开发和生产，最终应用于控制蓝藻水华。

附图说明

图1为分离得到的不同菌株对铜绿微囊藻9110的作用效果示意图；

图2为短波单胞菌J4对铜绿微囊藻9110的溶藻效果示意图；

图3为不同方式处理后的短波单胞菌J4发酵液的溶藻效果示意图，图中A、B、C、D分别为短波单胞菌J4发酵液、无菌发酵液、高温处理后的无菌发酵液、无上清的菌细胞液；

图4为短波单胞菌J4无菌发酵液的甲醇萃取物的藻平板结果示意图；

图5为牛肉膏蛋白胨培养基的甲醇萃取物的藻平板结果示意图。

具体实施方式

下面用实例详述本发明，但本发明的保护范围并不局限于此。

1.溶藻细菌的筛选