[发明专利]全真一气汤多糖的提取纯化的方法

权利要求书

1.一种全真一气汤多糖的提取纯化的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：

1)按全真一气汤配方比例称取熟地黄、白术、人参、麦冬、五味子、附子、牛膝，除熟地外，其余药材干燥，粉碎；

2)将熟地切段，与步骤1)粉碎后的药材混合，用超声提取法提取药材1-3次，每次7-9倍水提取25-35min后粗滤，静置过夜后离心分离，取上清液；

3)将步骤2)中的上清液浓缩至相对密度为1.15-1.2，用乙醇调至药液乙醇含量为75-85％，静置后离心分离，取下层沉淀用乙醇洗涤后于55-65℃真空干燥得粗多糖A；

4)取步骤3)粗多糖A加水溶解，摇匀，酸调节pH至5-6，加入木瓜蛋白酶,在45-55℃，酶解4-6h，灭活，离心除去沉淀，取下层液得粗多糖酶解液B；

5)向步骤4)粗多糖酶解液B中加入其体积1/4-1/6的氯仿-正丁醇溶液，震荡，静置过夜，收集上层水相溶液，得到多糖溶液B；

6)取步骤5)多糖溶液B，加水配制成浓度为3-5mg/ml的溶液，调节多糖溶液的pH至4.5-5.5，加入大孔树脂在45-55℃水浴下搅拌1-3h，过滤的粗多糖B；

7)取步骤6)粗多糖B加水制成浓度为4-6mg/mL的溶液，将溶液装入透析袋中，封好两端，放入水中透析，每隔20-28h换一次水，48h后，取出透析袋中的溶液，55-65℃真空干燥即得精多糖。

2.据权利要求1所述的全真一气汤多糖的提取纯化的方法，其特征在于，步骤1)所述的干燥温度均为60℃。

3.根据权利要求1所述的全真一气汤多糖的提取纯化的方法，其特征在于，步骤2)所述的超声条件为在室温下超2s停2s，功率800w。

4.根据权利要求1所述的全真一气汤多糖的提取纯化的方法，其特征在于，步骤2)、步骤3)和步骤4)所述的离心条件均为5000rpm×10min。

5.根据权利要求1所述的全真一气汤多糖的提取纯化的方法，其特征在于，步骤3)所述的上清液浓缩是在60℃旋转蒸发至药液相对密度为1.15-1.2。

6.根据权利要求1所述的全真一气汤多糖的提取纯化的方法，其特征在于，步骤4)所述的酸为冰醋酸。

7.根据权利要求1所述的全真一气汤多糖的提取纯化的方法，其特征在于，取步骤2)粗多糖A:水:木瓜蛋白酶的质量比是1：50:1.5。

8.根据权利要求1所述的全真一气汤多糖的提取纯化的方法，其特征在于，步骤4)所述的灭活是沸水浴灭活5min。

9.根据权利要求1所述的全真一气汤多糖的提取纯化的方法，其特征在于，步骤6)所述的大孔树脂是大孔树脂AB-8。