[发明专利]一种溪黄草及纤花线纹香茶菜的DNA鉴别方法

说明书

技术领域

本发明属于植物物种鉴定领域，具体而言，本发明涉及溪黄草、线纹香茶菜的物种鉴别方法。

背景技术

中药溪黄草是广东福建一带居民传统用药，其利湿退黄，用于肝炎、急慢性胆囊炎、痢疾等疾病的治疗，并作为凉茶日常保健食用。

在中药界，部分中药材的名字与其基原，即植物分类学名字不一致。中药溪黄草就存在着这种状况，民间传统使用的中药溪黄草是唇形科植物线纹香茶菜[拉丁名为Rabdosia lophanthoides(Buch.-Ham.ex D.Don)H.Hara或Isodon striatus(Benth.)Kudo]及其变种纤花香茶菜[拉丁名为Rabdosia lophanthoides(Buch.-Ham.ex D.Don)H.Hara var.graciliflora(Benth.)H.Hara或lsodon lophanthoides(Buch.-Ham.ex D.Don)H.Hara var.graciliflora(Benth.)H.Hara]；同时，由于没有相关标准规范，在药材市场上有唇形科植物溪黄草[拉丁名为Isodon serra(Maxim.)Kudo或Rabdosia serra(Maxim.)H.Hara]混同使用；另外，相关学术专著及地方标准专著中收录的溪黄草的基原不一致，关于基原的确定及品种的鉴别都有矛盾之处：《常用中草药手册》、《广东中兽医常用草药》、《全国中草药汇编》(上册)、《中药大辞典》及广东、广西、湖南等地方的中药材标准，均记载为溪黄草的基原是线纹香茶菜Isodon lophanthoides(Buch.-Ham.ex D.Don)Hara)，其中《广东省中药材标准》第二册同时将植物溪黄草Rabdosia serra(Maxim.)H.Hara作为基原之一收录进去，但是在植物鉴别中，溪黄草Rabdosia serra(Maxim.)H.Hara的一些生药特征不符合标准(本专利申请下文中所述“溪黄草”均指的是唇形科植物溪黄草[拉丁名为Isodon serra(Maxim.)Kudo或Rabdosia serra(Maxim.)H.Hara]，而不是中药溪黄草)。

植物溪黄草与线纹香茶菜为双子叶植物唇形科下的两个种，新鲜的植株上两者的茎、叶等形态外观上差异大，但经干燥或切段后两者不易分辨。在市场流通的中药材通常为干品。有效的鉴别方法既能区别植物溪黄草与线纹香茶菜，又能在基原的确立研究中提供部分技术手段。

目前针对这两种植物及饮片的鉴别方法有性状鉴定、显微鉴定和理化鉴定等方法。这些现有技术对操作人员的经验依赖度高，而传统鉴定方法的理论基础建立于分类群的性状特征分析，这些性状特征是与环境紧密相关的表现型，在鉴别时易受环境因素影响及样品形态和材料部位的限制，出现误差。

中药的品种真伪鉴别直接关系到用药安全及临床疗效。因此，目前迫切需要提供能够准确鉴定溪黄草植物物种、从而能够帮助准确用药的新方法。

分子生物学鉴定是目前应用DNA分子标记技术来鉴定中药原植物及其药材和饮片的新方法。简而言之，从分子遗传角度来看，物种的表现型归根结底应追溯到基因型的差异，即在DNA序列上的差异。因此，对基因组序列差异的比较研究为植物分类和鉴定提供了最本质的依据。

近年来，随着分子生物学技术的发展，DNA分子标记技术已广泛用于药用植物遗传多样性、系统学、分类学研究，并逐渐渗透到中草药的鉴定领域，推动了中草药鉴定研究的发展。DNA分子作为遗传信息的载体，信息含量大，在同种内具有高度的遗传稳定性，且不受外界环境因素和生物发育阶段及器官组织差异的影响，因此用DNA分子特征作为遗传标记进行中草药鉴别具有更为准确可靠，非常适用于近缘种、易混淆品种、珍稀品种等的植物鉴定。