[发明专利]一种水稻细胞质雄性不育系的选育方法

权利要求书

1.一种水稻细胞质雄性不育系的选育方法，其特征在于，包括以下步骤：

以东乡野生水稻为母本，分别与第一水稻品种杂交，得到第一杂交子代；其中，所述第一水稻品种包括：红优早籼、837、81-417或73-07；

将所述第一杂交子代作为母本，并与第二水稻品种进行杂交，得到第二杂交子代；其中，所述第二水稻品种包括：红410或HA79317-7；

在所述第二杂交子代中分离出雄性不育株，并作为母本，分别与第三水稻品种进行杂交，得到第三杂交子代；其中，所述第三水稻品种包括：B11、B51、培矮64、R4005或3037；

将所述第三杂交子代作为父本，以所述雄性不育株作为母本，进行回交，转育成水稻细胞质雄性不育系。

2.根据权利要求1所述的水稻细胞质雄性不育系的选育方法，其特征在于；

所述第一水稻品种为：73-07；

所述第三水稻品种为：R4005。

3.根据权利要求1所述的水稻细胞质雄性不育系的选育方法，其特征在于，在所述以东乡野生水稻为母本，分别与第一水稻品种杂交，得到第一杂交子代的步骤中，所述杂交具体包括：

将所述东乡野生水稻的雄蕊去除，15-20小时后，将所述第一水稻品种的花粉授在去除雄蕊后的所述东乡野生水稻的雌蕊上，并在花朵上套设牛皮纸袋。

4.根据权利要求1所述的水稻细胞质雄性不育系的选育方法，其特征在于，在将所述第三杂交子代作为父本，以所述雄性不育株作为母本，进行回交，转育成水稻细胞质雄性不育系的步骤之后，还包括：

根据配子体不育基因orf(H)79和孢子体不育基因WA352依次设计第一引物和第二引物；

分别以所述水稻细胞质雄性不育系、红莲型不育系粤泰A和滇型不育系楚粳23A的总DNA作为模板，用所述第一引物进行PCR扩增，将扩增产物进行电泳检测；

分别以所述水稻细胞质雄性不育系、珍汕97A、冈46A、协青早A的总DNA为模板，用所述第二引物作为进行PCR扩增，将扩增产物进行电泳检测。

5.根据权利要求4所述的水稻细胞质雄性不育系的选育方法，其特征在于，

所述第一引物的序列为：GAGGAGCCGAAGATTTTAG

                      TTACTTAGGAAAGACTACAC；

所述第二引物的序列为：ATGACGAGAGATAGAATGAG

                      CTAGGAGGCTGAGTTTTG。

6.根据权利要求3所述的水稻细胞质雄性不育系的选育方法，其特征在于，在所述将所述第三杂交子代作为父本，以所述雄性不育株作为母本，进行回交，转育成水稻细胞质雄性不育系的步骤之后，还包括：

以所述水稻细胞质雄性不育系作为细胞质供体，分别与保持系Ⅱ-32B、岳4B、K17B和荣丰B杂交，得到雄性不育的F1代，将所述F1代进行连续回交，获得物无花粉型的水稻细胞质雄性不育系。

7.根据权利要求3所述的水稻细胞质雄性不育系的选育方法，其特征在于，在将所述第三杂交子代作为父本，以所述雄性不育株作为母本，进行回交，转育成水稻细胞质雄性不育系的步骤之后，还包括：

以所述东乡野生水稻为父本，与栽培稻M1256杂交，得到第一杂种；将所述第一杂种与爱红1号杂交，得到第二杂种；

所述第二杂种并经过多代回交和自交，获得了多个稳定株系；

将多个所述稳定株系分别与水稻细胞质雄性不育系进行测交，根据测交后代的自然结实率筛选出能够使所述水稻细胞质雄性不育系自然可育的恢复系。

8.根据权利要求1所述的水稻细胞质雄性不育系的选育方法，其特征在于，在所述第二杂交子代中分离出雄性不育株，并作为母本，分别与第三水稻品种进行杂交，得到第三杂交子代的步骤中，所述分离出雄性不育株具体包括：

在第二杂交子代的植株中，取当日要开的颖花，用1％的I2-KI溶液染色，镜检着色花粉粒；同时，计算所述植株3个穗的自然结实率和套袋结实率；

挑选出自然结实率在5％以下、套袋结实率为0、着色花粉粒占总花粉数5％以下的植株，得到雄性不育株。