[发明专利]一种次血红素三肽及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种次血红素三肽，是次血红素的羧基与三肽分子中丙氨酸残基上的氨基以酰胺键相连，其特征在于，所述的三肽，链接方式依次为β-Ala残基、His残基、Lys残基；具体结构式是：

或/和

2.根据权利要求1所述的次血红素三肽，其特征在于，以次血红素三肽结构为基础，将单甲氧基聚乙二醇琥珀酰亚胺酯的衍生物与次血红素三肽分子中赖氨酸残基上的ε-氨基通过亲核取代反应以酰胺键相连，得到一种单甲氧基聚乙二醇修饰的次血红素三肽；具体结构式是：

结构式中，Dh表示次血红素；44≤n≤447，k＝0～3；聚乙二醇分子量范围为2000～20000道尔顿。

3.根据权利要求1或2所述的次血红素三肽，其特征在于，所述的血红素三肽，制成载药聚酯微球；所述的载药聚酯微球，是用聚乳酸-羟基乙酸共聚物或聚乙二醇-聚乳酸-羟基乙酸共聚物对次血红素三肽或血红素三肽衍生物进行包埋得到。

4.一种权利要求1的次血红素三肽的制备方法，是Fmoc固相合成方法，具体过程是：

①树脂溶胀：称取2mmol Rink-NH₂树脂，加入50ml二氯甲烷溶胀2h，抽滤，用二甲基甲酰胺洗涤树脂6次；

②脱保护:加入100ml20％哌啶/二甲基甲酰胺溶液，于室温震荡30min，抽滤，用二甲基甲酰胺洗涤树脂6次，用显色剂检测氨基脱保护情况，当树脂颗粒全部变为蓝色为脱保护完全；

③连接氨基酸：将Fmoc-β-Ala-OH、PyBOP、HOBT、NMM和Rink-NH₂树脂按摩尔比为3:3:3:3:1依次加入反应器中，加入50ml二甲基甲酰胺室温震荡1h，抽滤，用二甲基甲酰胺洗涤树脂6次，用显色剂检测氨基酸连接情况，树脂颗粒全部变为透明的黄色为反应完全；重复步骤②③，连接后续的Fmoc-His(Trt)-OH和Fmoc-Lys(Trt)-OH；

④连接血红素：重复步骤②，加入4倍过量的亚铁血红素反应3小时；抽滤,用二甲基甲酰胺洗涤树脂6次；

⑤切割：加入100ml切割试剂；切割试剂组成为95％三氟乙酸、2.5％三异丙基硅烷和2.5％水，室温反应3h，抽滤，将滤液旋转蒸；

⑥沉淀：将所得残留液加入300ml乙醚中沉淀，离心，收集，得次血红素三肽粗品1.7克；

⑦纯化：得到的粗肽用反相制备液相色谱纯化，流动相：0.1％三氟乙酸/10～90％乙腈/水梯度洗脱，接收主峰，蒸出溶剂旋转蒸发，所得水溶液冻干，得产物次血红素三肽纯品1.5克。

5.一种权利要求1的次血红素三肽在制备预防及治疗2型糖尿病药物中的应用。

6.根据权利要求5所述的次血红素三肽的应用，其特征在于，在次血红素三肽中，加入粘合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、调味剂、增溶剂、溶剂、防腐剂、赋形剂中的一种或几种，制备成片剂、丸剂、胶囊剂、冲剂、喷雾剂、口服液、混悬液、透皮吸收剂或注射剂。

7.根据权利要求5或6所述的次血红素三肽的应用，其特征在于，次血红素三肽与二甲双胍、艾塞那肽、胰岛素联合用药。

8.一种权利要求2的次血红素三肽衍生物的应用，用于制备预防及治疗2型糖尿病药物。

9.根据权利要求8所述的次血红素三肽衍生物的应用，其特征在于，在次血红素三肽衍生物中，加入粘合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、调味剂、增溶剂、溶剂、防腐剂、赋形剂中任意一种或几种，制备成片剂、丸剂、胶囊剂、冲剂、喷雾剂、口服液、混悬液、透皮吸收剂或注射剂。

10.根据权利要求8或9所述的次血红素三肽衍生物的应用，其特征在于，次血红素三肽衍生物与二甲双胍、艾塞那肽、胰岛素联合用药。