[发明专利]一种采用复合微生物菌剂用于高羊茅抗低温的方法

权利要求书

1.一种复合微生物菌剂，其特征在于它是由下述成分组成：

       施氏假单胞菌+里氏木霉+黄链霉菌100倍稀释液或

        施氏假单胞菌+里氏木霉+黄链霉菌200倍稀释液；

其中施氏假单胞菌：里氏木霉：黄链霉菌的体积份数比为1:1:1。

2.权利要求1所述的复合微生物菌剂，其中所述的原料为：施氏假单胞菌+里氏木霉+黄链霉菌100倍稀释液。

3.一种采用复合微生物菌剂用于高羊茅抗低温的方法，其特征在于按如下的步骤进行：

（1）材料的选择：

选取挑选籽粒饱满、均匀一致的高羊茅 ( Festuca arundinacea L .) 种子为试验材料；供试土壤为普通园土；

（2）试验方法

 复合微生物菌剂制备：选取施氏假单胞菌、里氏木霉和灰黄链霉菌，将分离出的菌种纯化培养2代，取活化菌种，接入装有200 mL液体培养基的三角瓶中，180 r/min适温培养，选用600 nm波长进行比浊测定，以菌悬液的OD600 nm值为纵坐标，培养时间为横坐标，绘制微生物的生长曲线；选取对数生长期的菌种，按照下面要求配制复合微生物菌剂；                        

    施氏假单胞菌+里氏木霉+黄链霉菌100倍稀释液或

施氏假单胞菌+里氏木霉+黄链霉菌200倍稀释液；

其中施氏假单胞菌：里氏木霉：黄链霉菌的体积份数比为1:1:1;

3菌种的菌落数在(2.15±0.03)×10⁹/ml~ (2.07±0.07)×10⁹/ml之间，假单胞菌的OD600 nm值为0.592；

（3）实验设计

试验采取室内盆栽的方法，在直径为9 cm的培养皿中加入100 g灭菌土壤，均匀撒入0.5 g饱满的高羊茅种子，温室种植，每天早晚各浇1次水，待植物生长到15 d后，分别加入施氏假单胞菌、里氏木霉及灰黄链霉菌的复合微生物菌剂的100倍稀释液和200倍稀释液各15ml，草坪植物培养期间，温度为12~20^oC，相对湿度为25~45%，光照为透入室内的自然光，持续处理20 d后测定各指标，测定高羊茅的株高、单株生物量以及叶绿素；

    在测定完上述指标后再次加入复合微生物菌剂15ml，然后将植物进行低温过度，过度期的温度为5~12^oC，过度持续一周，然后按照普通草坪过冬准备来去掉高羊茅中的干草、烂草、枯草，然后将高羊茅剪至4-5 cm，浇足越冬水，最后将高羊茅连带培养容器一起放到留有小孔的封口纸箱内，放到阴面无暖气的屋子里过冬，过冬期间温度为-8-10℃，持续40天后将植物移到温室培养，进行返青处理，测定其返青情况。

4.复合微生物菌剂在促进高羊茅株高、地上生物量和叶绿素含量提高其抗寒性方面的应用。

5.复合微生物菌剂在促进高羊茅低温条件下株高、干鲜重提高方面的应用。

6.复合微生物菌剂在显著提高低温条件下高羊茅叶绿素含量，提高其抗寒性方面的应用。