[发明专利]小麦品种中国春的Waxy蛋白亚基和其编码基因及应用无效
申请号: | 201410193398.5 | 申请日: | 2014-05-08 |
公开(公告)号: | CN104031130A | 公开(公告)日: | 2014-09-10 |
发明(设计)人: | 陈其皎;高翔;孟敏;董剑;赵万春 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C12N15/29;C12N15/10;C12N15/70;A21D2/26 |
代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 董芙蓉 |
地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 小麦 品种 中国 waxy 蛋白 编码 基因 应用 | ||
1.小麦品种中国春的Waxy蛋白亚基,其特征在于氨基酸序列为SEQ ID NO1;其编码基因的核苷酸序列为SEQ ID NO2。
2.小麦品种中国春的Waxy蛋白亚基,其特征在于氨基酸序列为SEQ ID NO3;其编码基因的核苷酸序列为SEQ ID NO4。
3.小麦品种中国春的Waxy蛋白亚基,其特征在于氨基酸序列为SEQ ID NO5;其编码基因的核苷酸序列为SEQ ID NO6。
4.小麦品种中国春Waxy蛋白亚基编码基因的克隆方法,其特征在于小麦品种中国春小麦的cDNA为模版,采用下述引物进行PCR克隆:
上游引物5’-ATGGCGGCTCTGGTCACGT-3’;
下游引物5’-TCAGGGAGCGGCGACGTT-3’。
5.小麦品种中国春Waxy蛋白亚基的表达方法,其特征在于包括构建重组表达质粒和重组质粒进行诱导表达的步骤。
6.根据权利要求5所述的表达方法,其特征在于构建重组表达质粒包括如下步骤:将PCR克隆得到的产物回收的目的片段用表达载体连接,然后连接产物转化入感受态细胞,在涂有氨苄青霉素的LB平板上筛选阳性克隆。
7.根据权利要求7所述的表达方法,其特征在于所述表达载体为pEASY-E1,所述感受态细胞为大肠杆菌DH5α。
8.根据权利要求5所述的表达方法,其特征在于重组质粒的诱导表达包括如下步骤:将筛选出的阳性克隆质粒转化到表达宿主细胞,筛选高效表达Waxy蛋白亚基的菌株,扩大培养细胞及诱导表达,通过纯化获得重组蛋白。
9.根据权利要求8所述的表达方法,其特征在于所述表达宿主细胞为E.coli Rosettagami B(DE3)。
10.小麦品种中国春的Waxy蛋白亚基在提高面粉品质中的应用。
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