[发明专利]姜黄素在检测次氯酸中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及次氯酸根检测技术，具体属于一种以姜黄素为荧光试剂，快速、定量荧光检测次氯酸根的方法。

背景技术

在印度香料姜黄中，姜黄素是天然黄色染料的主要来源，它具有独特的共轭结构包括两个甲氧基化酚和α-二酮的烯醇式。姜黄素的结构式：

由于其特殊的结构、潜在药理作用和不可忽略的细胞毒性，许多有关研究其性质的研究被报道。在过去的几十年研究表明，姜黄素有强效的抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗HIV、抗菌等特性。

发明内容

本发明的目的是为了把具有对生物体的兼容性和温和性的药物分子姜黄素开发为荧光探针，并用于次氯酸的检测，本发明荧光检测次氯酸根的方法体系廉价、操作方便、选择性高、灵敏度高。

本发明将天然药物姜黄素作为荧光试剂在检测ClO^-中应用。

本发明提供的一种荧光检测ClO^-的方法，步骤为：

(1)、配制2mM的姜黄素甲醇溶液；

(2)、按体积比400:1将甲醇溶液和姜黄素甲醇溶液加到干净的荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，随着待测样的加入,544nm的荧光强度逐渐减弱；

(3)、用蒸馏水配制2mM的ClO^-溶液，把2mL的甲醇溶液和5μL的姜黄素甲醇溶液加到荧光比色皿中，逐渐加入ClO^-溶液的体积为1、2、3、4、5μL，同时在荧光光谱仪上测定544nm对应的荧光强度F为369、286、187、101、21，以ClO^-浓度为横坐标，以相对荧光强度F₀-F为纵坐标绘制图，F₀﹦451，得到ClO^-浓度的工作曲线；线性回归方程为：F₀-F＝88.1c-6.1，c的单位为10^-6mol/L；

(4)、将甲醇溶液2000uL和姜黄素甲醇溶液5uL加到干净的荧光比色皿中，用微量进样器吸取VμL待测样品溶液，加入到此干净的荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，将测得的荧光强度代入(3)的线性回归方程，得到浓度c，待测样品C_待测样＝(2000+V_待测样)μL×c×10^-6/VμL,即可求得ClO^-的浓度。

经实验证明，其它分析物不干扰体系对ClO^-的测定。

与现有技术相比，本发明具有如下优点和效果：1、检测试剂为天然药物，有好的生物兼容性和温和性；2、本发明的检测方法，对ClO^-显示了高的灵敏性和选择性；3、检测手段简单，只需要借助荧光光谱仪即可实现。

附图说明

图1实施例1姜黄素与ClO^-作用的荧光发射图

图2实施例2姜黄素与各种分析物的荧光柱状图

图3实施例3工作曲线

图4实施例4细胞成像图

具体实施方式

实施例1

用甲醇配制2mM的姜黄素溶液；把2mL的甲醇溶液及5μL的姜黄素甲醇溶液加到干净的荧光比色皿中，取ClO^-的溶液，逐渐用微量进样器加到此比色皿中，边加样边在荧光分光光度仪上检测，随着ClO^-的加入，544nm处荧光强度逐渐减弱。荧光发射图见图1。

实施例2

用甲醇配制2mM的姜黄素溶液；在12个荧光比色皿中，各加入2mL的甲醇溶液和5μL的姜黄素甲醇溶液，再分别加入1摩尔当量的ClO^-，以及20摩尔当量的其他各种分析物(H₂O₂,¹O₂,NO,O₂·^-,HO·,P₂O₇^4-,IO₄^-,ONOO^-,ROO·,ClO₂^-,S₂O₃^2-)，在荧光分光光度仪上检测，绘制不同分析物对应的544nm荧光强度的柱状图，见图2(ClO^-使得姜黄素的荧光强度由451变到21左右，其它的分析物基本没有引起姜黄素荧光强度的变化)。