[发明专利]一种短蛸胃肠道产蛋白酶菌株及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，尤其涉及一种短蛸胃肠道产蛋白酶菌株及其应用。

背景技术

蛋白酶是作用于蛋白质或多肽催化肽键水解的水解酶类，是最重要的三大工业用酶之一，具有催化能力高、反应条件温和、底物专一性等特点。蛋白酶的销售额约占全球酶制剂市场的60％，对经济的发展起着重要的作用。蛋白酶广泛分布于动物、植物、微生物中。通过微生物发酵产生的蛋白酶我们把它称之为微生物蛋白酶，与菠萝、木瓜、猪胰脏等传统的动植物资源相比，微生物蛋白酶资源具有无法比拟的优势。随着基因工程的加入、发酵技术的发展、酶制剂的广泛应用及新型发酵设备的发明，微生物成为工业用蛋白酶的主要来源。蛋白酶的用途非常广泛，最大的用途是洗涤剂，其次用于饲料、食品工业、酿酒酿造，以及制革工业和医药。全世界洗涤剂的年产量已达1.3亿吨，在欧洲加酶洗衣粉的比例达到80％左右，美国45％的洗涤剂加酶，日本加酶的洗衣粉比例也达60％以上，全世界碱性蛋白酶的销售额约占世界酶制剂市场的25％。

我国是世界上最大的养殖生产国、饲料原料(特别是蛋白质原料)需求大国之一，但是我国饲料工业生产中蛋白质饲料资源的严重不足，鱼粉等高品质动物蛋白原料主要依赖国际进口，而目前全球性鱼类资源的日趋减少直接导致鱼粉价格上涨，动物蛋白价格高涨使得人们将视线逐渐转向了植物蛋白。豆粕作为一种质量稳定的植物蛋白原料，一直是饼粕消费的主体，加之动物性蛋白资源日益短缺，价格居高不下，促使豆粕植物性蛋白原料需求的扩大。但由于豆粕中抗营养因子的存在以及其适口性差等问题限制了豆粕的应用价值。

目前，我国的蛋白酶研究还存在蛋白酶种类单一、微生物来源较少等问题，因此寻找和开发新的微生物蛋白酶来源是目前科研的重点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种短蛸胃肠道产蛋白酶菌株及其应用，旨在解决我国蛋白酶研究还存在蛋白酶种类单一、微生物来源较少等问题。

本发明是这样实现的，一种短蛸胃肠道产蛋白酶菌株(Vibrio sp.S-3)，于2013年9月30日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.8299，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。该短蛸胃肠道产蛋白酶菌株的16S rRNA序列如序列表中SEQ ID NO：1所示，该菌株为革兰氏阴性菌，菌落为乳白色、圆形、平整、边缘整齐湿润的光滑小菌落。

本发明进一步提供上述短蛸胃肠道产蛋白酶菌株在生产洗涤剂添加剂方面的应用。

本发明进一步提供上述短蛸胃肠道产蛋白酶菌株在生产酶解豆粕的蛋白酶方面的应用。

相比于现有技术的缺点和不足，本发明具有以下有益效果：本发明从短蛸胃肠道内筛选了一种产蛋白酶菌株Vibrio sp.S-3，高效地产生蛋白酶，用于洗涤剂添加剂，酶解豆粕，提高了资源利用率，降低了生产成本。

附图说明

图1为本发明实施例1中各菌株发酵液的蛋白酶活力图；

图2为本发明实施例1中Vibrio sp.S-3系统发育树；

图3为本发明实施例2中不同碳源对Vibrio sp.S-3菌株产蛋白酶的影响图；

图4为本发明实施例2中不同氮源对Vibrio sp.S-3菌株产蛋白酶的影响图；

图5为培养基起始pH值对Vibrio sp.S-3菌株产蛋白酶的影响图；

图6为本发明实施例2中培养温度对Vibrio sp.S-3菌株产蛋白酶活力的影响图；

图7为本发明实施例2中培养时间对Vibrio sp.S-3菌株产蛋白酶活力的影响图。

具体实施方式

以往人们多从土壤、温泉水中采集样本筛选产蛋白酶微生物，近年来，人们逐渐将开发利用的眼光投向海洋。海洋特有的环境造就了海洋生物的多样性与独特性，低温、高压、高盐量使得海洋生物中一些酶、激素以及其他代谢产物有着极高的活性，海洋生物也将成为各国学者研究的主要对象。章鱼属软体动物门(Mollusca)、头足纲(Cephalopoda)、八腕目(Octopoda)、章鱼科(octopodidae)，学名“蛸”。其体短，卵圆形，无鳍，头上生八腕，腕长短不等，腕间有膜相连，腕上吸盘无柄。根据腕的长短，章鱼主要分为8种，分别为短蛸、卵蛸、双点蛸、真蛸、环蛸、长蛸、纺锤蛸、嘉庚蛸。本发明所选用的章鱼为短蛸(Octopus ocellatus)，属软体动物门、头足纲、八腕目、章鱼科、蛸属，主要栖居于温带偏北海域，是我国北方沿岸蛸类中最重要的经济种。