[发明专利]胡桃楸诱导不定芽的方法

权利要求书

1.一种胡桃楸诱导不定芽的方法，其特征在于：

(1)外植体的选择

每年8-10月份采取成熟的胡桃楸种子，经清水洗涤、在阳光下晾晒将胡桃楸外表皮去除掉，放置温度20-25℃条件下干燥、通风处备用，用锤子将外壳打碎，取胡桃楸种子尖部那端带少量子叶的合子胚，

(2)合子胚消毒

先用70％乙醇浸润30秒2次，然后用0.1％的升汞HgCl₂溶液消毒15分钟，用无菌水冲洗5-7次，然后在无菌水中浸泡2-4小时，备用，

(3)合子胚预培养

在无菌水中浸2-7小时后，将消毒后的胡桃楸合子胚外表皮去掉，接种于添加激素吲哚乙酸IBA0.01mg/L的MS培养基中培养，蔗糖30g/L，琼脂6g/L，培养温度24-26℃，光照时间16h/d，光照强度20001x，培养25-30天，

(4)不定芽外植体的选择

待培养后的胡桃楸合子胚基部子叶张开，发育成带不同个数腋芽的小植株后，将胡桃楸植株基部存在的子叶掰掉，用镊子夹紧植株茎段，用无菌剪刀将胡桃楸植株从基部处开始剪成1.0-2.0cm左右各带不同腋芽的茎段，作为不定芽诱导分化的外植体，

(5)诱导和分化

将外植体接种在不定芽诱导培养基中，培养基为DKW培养基附加激素6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)2.0mg/L及IBA0.01mg/L，同时附加腺嘌呤AD10mg/L，蔗糖30g/L，琼脂6g/L，培养温度为25-27℃、光照时间16h/d，光照强度1000-2000l x，培养7-8天后外植体基部切口处边缘出现绿色芽点，培养15-20天获得诱导丛生芽，丛生芽经过分株后再接种于培养基上培养后获得大量不定芽。