[发明专利]一种改进的氨苄西林的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种氨苄西林的制备方法，具体涉及一种改进的酶法制备氨苄西林的方法。

背景技术

氨苄西林，化学名为(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6-[(R)-2-氨基-2-苯乙氨基]-7-氧代-4-硫杂-1-氮杂双环[3.2.0]庚烷-甲酸，其游离酸含3分子结晶水，它是一种常用的青霉素类广谱β-内酰胺类抗生素。

氨苄西林杀菌作用、穿透细胞壁的能力很强，是目前应用较为广泛的口服青霉素之一。氨苄西林的制备有化学合成法和酶法制备法，化学法相对反应条件苛刻，反应步骤复杂，而且对环境污染较大。而酶促合成方法可以显著减少反应步骤，反应条件温和，是生产氨苄西林的重要途径之一。

《氨苄西林酶促合成方法与介质体系的研究》(潘绳彬，浙江大学理学院，硕士学位论文，20070901)报道了不同介质体系下的氨苄西林酶促的合成方法，主要介绍了有机体系和两项体系下合成氨苄西林的方法，由于对环境保护的要求，有机体系介质中酶促合成氨苄西林，存在着对环境的污染的问题；而水相体系中相对符合环保要求，但该文中记载的在研究水相体系下的酶促合成氨苄西林的产率并不是很高，即使最佳反应条件下其产率也才为65.6％，而且该水相介质中加入了有机溶剂，底物浓度的比例不适当(例如1:2)，D-苯甘氨酸甲酯盐酸盐用量较大、不是最经济的和不是最适合大生产，而且实践证明引入的侧链越多、产品的质量越差，侧链不能反应就是产品中的杂质；现有技术文献为了提高反应效率而添加有机溶剂，与完全水相中反应相比，不利于经济环保，低毒，过敏源减少；而如何提高纯水相体系下的氨苄西林产率，依然有待进一步的研究，同时提高氨苄西林产品的质量、保证用药安全、同样是药品研发领域进一步追求的目标。

发明内容

针对以上技术缺陷，本发明提供了一种改进的酶法制备氨苄西林的方法。所述方法包括以下步骤：

1)在0℃～30℃条件下，将6-APA与D-苯甘氨酸甲酯或其盐于水中混合加入到氨苄西林合成酶中,在pH值为5.5～7.5，温度为10℃～30℃下进行反应；

2)将步骤1)所得产物，用酸调至溶液澄清，保持pH值为0.5-2.0，温度为10℃-30℃；

3)将步骤2)所得溶液，降温至12～15℃，然后调节pH至3.00～3.50，再降温至5-6℃、pH值维持在3.50；然后调pH为4.9-5.0，降温到1-2℃保持，即得氨苄西林结晶。

本发明的所述步骤1)中，作为实施方式之一，所述6-APA与D-苯甘氨酸甲酯或其盐与中混合加入到氨苄西林合成酶中的方式，包括但不限于：将6-APA固体与D-苯甘氨酸甲酯或其盐的固体于水中混合后搅拌直接加入到氨苄西林合成酶中；或将6-APA固体先溶解然后加入到氨苄西林合成酶中，然后缓慢加入D-苯甘氨酸甲酯或其盐液体；然后在pH值为5.5～7.5、温度为10℃～30℃条件下进行反应；

本发明的所述步骤1)中，作为实施方式之一，其中所述D-苯甘氨酸甲酯的盐包括但不限于盐酸盐，还可以是本领域常用的D-苯甘氨酸甲酯的其他药用盐。

本发明的所述步骤1)中，作为实施方式之一，所述pH值为5.5～7.5，pH值范围包括但不限于5.5～7.0、6.0～7.5、6.6～7.5或6.0～7.0；同样pH值可以为5.5、5.8、6.0、6.3、6.5、6.8、7.0、7.2或7.5；本发明的所述步骤1)中，作为实施方式之一，所述pH值为6.2～6.5。

本发明的所述步骤1)中，作为实施方式之一，所述反应温度10℃～30℃范围包括但不限于：10℃～25℃、10℃～20℃、15℃～20℃、15℃～25℃、15℃～30℃、20℃～30℃、25℃～30℃；

作为实施方式之一，所述温度可以是10℃、11℃、12℃、13℃、14℃、15℃、16℃、17℃、18℃、19℃、20℃；21℃、22℃、23℃、24℃、25℃、26℃、27℃、28℃、29℃或30℃；作为实施方式之一，所述反应温度优选为10℃～15℃

作为本发明实施方式之一，所述步骤1)中，混合及反应过程中的温度优选为10℃～15℃；反应过程中的pH值为6.2～6.5；当6-APA的残留量低于2mg/ml时，结束反应。

当本发明步骤1)的反应过程中，为了保持上述pH值范围，可选择地使用包括但不限于3N的氨水溶液进行适当调节。