[发明专利]模块式DNA结合结构域及使用方法有效

申请号：	201410199018.9	申请日：	2010-01-12
公开（公告）号：	CN103992393B	公开（公告）日：	2019-07-05
发明（设计）人：	乌拉·博纳斯;延斯·博赫;塞巴斯蒂安·朔尔纳克;托马斯·拉艾	申请（专利权）人：	乌拉·博纳斯;延斯·博赫;塞巴斯蒂安·朔尔纳克;托马斯·拉艾
主分类号：	C07K14/00	分类号：	C07K14/00;C12N15/63
代理公司：	中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038	代理人：	孙式洪
地址：	德国***	国省代码：	德国;DE
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摘要：
搜索关键词：	模块 dna 结合结构使用方法
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【权利要求书】：

1.融合蛋白，所述融合蛋白包含可操作连接至内切核酸酶结构域的识别靶DNA序列的重复序列结构域，其中所述重复序列结构域是来自转录激活子样(TAL)效应子的重复序列结构域的人工形式并包含至少一个衍生自转录激活子样(TAL)效应子的重复序列单元，所述重复序列单元的长度为33、34、35或39个氨基酸，其中所述重复序列单元包含决定所述靶DNA序列中碱基对的识别的高变区，并且其中所述高变区包含选自由以下组成的组的成员：

(a)用于识别C/G的HD；

(b)用于识别A/T的NI；

(c)用于识别T/A的NG；

(d)用于识别C/G或A/T或T/A或G/C的NS；

(e)用于识别G/C或A/T的NN；

(f)用于识别T/A的IG；

(g)用于识别C/G的N；

(h)用于识别C/G或T/A的HG；和

(i)用于识别T/A的H。

2.权利要求1的融合蛋白，其中所述重复序列结构域包含1.5至28.5个重复序列单元。

3.权利要求1的融合蛋白，其中所述重复序列结构域包含11.5、14.5或17.5个重复序列单元。

4.权利要求1的融合蛋白，其中所述靶DNA序列是启动子区。

5.权利要求1的融合蛋白，其中所述重复序列结构域包含12、12.5、13、13.5、14、14.5、15、15.5、16、16.5、17、17.5、18、18.5、19、19.5、20、20.5、21、21.5、22、22.5、23、23.5、24、24.5、25、25.5、26、26.5、27、27.5、28、28.5、29或29.5个重复序列单元。

6.产生细胞的基因组中的靶向改变的方法，其中所述细胞不包括人胚胎干细胞，所述方法包括使用含有用于识别预期靶DNA序列的重复序列结构域和诱导在靶DNA序列或其附近的DNA断裂的内切核酸酶结构域的效应子，其中所述重复序列结构域是来自转录激活子样(TAL)效应子的重复序列结构域的人工形式并包含至少一个衍生自转录激活子样(TAL)效应子的重复序列单元，其中所述重复序列单元的长度为33、34、35或39个氨基酸，其中所述重复序列单元包含决定所述靶DNA序列中碱基对的识别的高变区，并且其中所述高变区包含选自由以下组成的组的成员：