[发明专利]用于生产(+)-客烯的方法有效
申请号: | 201410200220.9 | 申请日: | 2010-05-12 |
公开(公告)号: | CN104017794B | 公开(公告)日: | 2019-04-23 |
发明(设计)人: | M·沙尔克;F·德盖里 | 申请(专利权)人: | 弗门尼舍有限公司 |
主分类号: | C12N9/88 | 分类号: | C12N9/88;C12N15/60;C12N15/10;C12N15/70;C12N15/81;C12N1/21;C12N1/19;C12P15/00;C12P5/00 |
代理公司: | 北京三幸商标专利事务所(普通合伙) 11216 | 代理人: | 刘激扬 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 生产 方法 | ||
1.具有(+)-客烯合酶活性的多肽,该多肽的氨基酸序列与SEQ ID NO:1有至少98%的同一性,其中该多肽是从岩兰草中分离出来的。
2.编码权利要求1所述的多肽的核酸,其中该核酸是从岩兰草中分离出来的。
3.根据权利要求2所述的核酸,其特征在于该核酸的核苷酸序列与SEQ ID NO:2、SEQID NO:11或它们的互补序列有至少98%的同一性。
4.包含权利要求2或3所述的核酸的表达载体。
5.根据权利要求4所述的表达载体,其为病毒载体、噬菌体或质粒的形式。
6.根据权利要求4或5所述的表达载体,包括权利要求2或3所述的核酸,该核酸可操作地与至少一种调控序列连接,该调控序列控制转录和/或翻译的开始和/或终止。
7.根据权利要求6所述的表达载体,其中该调控序列为转录的启动子、操纵子或增强子或mRNA核糖体的结合部位。
8.根据权利要求6所述的表达载体,其还包括至少一种选择标记。
9.一种非人宿主生物体,经转化以包含至少权利要求2或3所述的核酸,从而其异源表达或过表达权利要求1所述的至少一种多肽,其中,该非人宿主生物体为原核生物或真菌。
10.一种非人宿主生物体,经转化以包含至少权利要求2或3所述的核酸,从而其异源表达或过表达权利要求1所述的至少一种多肽,其中,该非人宿主生物体为微生物。
11.根据权利要求10所述的非人宿主生物体,其特征在于所述微生物为细菌或酵母。
12.根据权利要求11所述的非人宿主生物体,其特征在于所述细菌为大肠杆菌。
13.根据权利要求11所述的非人宿主生物体,其特征在于所述酵母为酿酒酵母。
14.一种细胞,经转化以包含至少权利要求2或3所述的核酸,从而其异源表达或过表达权利要求1所述的至少一种多肽,其中,该细胞为真菌细胞。
15.生产(+)-客烯的方法,包含:
a)将法呢基焦磷酸酯与权利要求1所述的至少一种多肽接触。
16.根据权利要求15所述的方法,其特征在于,还包含分离在步骤a)中产生的(+)-客烯。
17.根据权利要求15所述的方法,其特征在于步骤a)包含在有助于生产(+)-客烯的条件下培养权利要求9~13中任一项所述的非人宿主生物体或权利要求14所述的细胞。
18.根据权利要求17所述的方法,其特征在于还包含在步骤a)之前用权利要求2或3所述的至少一种核酸转化能够生产法呢基焦磷酸酯的非人宿主生物体或细胞以使所述生物体表达由所述核酸编码的多肽。
19.生产权利要求1所述的至少一种多肽的方法,包含:
a)培养权利要求9~13中任一项所述的非人宿主生物体或权利要求14所述的细胞;
b)从步骤a)中培养的非人宿主生物体或细胞中分离多肽。
20.根据权利要求19所述的方法,其特征在于还包含在步骤a)之前用权利要求2或3所述的至少一种核酸转化能够生产法呢基焦磷酸酯的非人宿主生物体或细胞,以使所述生物体表达由所述核酸编码的多肽。
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