[发明专利]一种筛查子宫内膜癌易感基因的无创检测试剂盒无效
申请号: | 201410203973.5 | 申请日: | 2014-05-15 |
公开(公告)号: | CN104450876A | 公开(公告)日: | 2015-03-25 |
发明(设计)人: | 郭文强;李成;杨华为;李珍;张弓;宁慧青 | 申请(专利权)人: | 太原深度解码基因科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 030006 山西省太*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 子宫 内膜 癌易感 基因 检测 试剂盒 | ||
1.一种筛查子宫内膜癌易感基因的无创检测试剂盒,包括:检测单核苷酸多态性位点基因型的特异性引物与DNA测序引物、PCR反应组件、PCR产物纯化组件和DNA测序反应组件,所述PCR反应组件包括Taq酶、dNTP混合液、反应缓冲液、ddH2O,所述PCR产物纯化组件包括SAP酶、ExoI酶、ddH2O,所述DNA测序反应组件包括BigDye mix,EDTA溶液、100%乙醇溶液、70%乙醇溶液、HIDI溶液、ddH2O,其特征在于:所述特异性引物是针对CYP1A1基因上单核苷酸多态性位点Msp I、CYP1B1基因上单核苷酸多态性位点Leu432Val、CYP17基因上单核苷酸多态性位点MspA1I、MDM2基因上单核苷酸多态性位点309和NQ01基因上单核苷酸多态性位点C609T,能特异性扩增出包含5个SNPs位点的DNA片段的引物对。
2.根据权利要求1所述的一种筛查子宫内膜癌易感基因的无创检测试剂盒,其特征在于:所述DNA测序引物是针对CYP1A1基因上单核苷酸多态性位点Msp I、CYP1B1基因上单核苷酸多态性位点Leu432Val、CYP17基因上单核苷酸多态性位点MspA1I、MDM2基因上单核苷酸多态性位点309和NQ01基因上单核苷酸多态性位点C609T,能通过DNA测序技术特异性检测出上述5个SNPs位点基因型的DNA测序引物。
3.根据权利要求1所述的一种筛查子宫内膜癌易感基因的无创检测试剂盒,其特征在于:所含的五对特异性引物序列如下:
1)CYP1A1Msp I正向引物:5’GGGAGGAAGAAGAGGAGGTAG3’
CYP1A1Msp I反向引物:5’AGGTTCTTGAAAGCAGGGACT3’
2)CYP1B1Leu432Val正向引物:5’TTGTGCCTGTCACTATTCCTCA3’
CYP1B1Leu432Val反向引物:5’AGCCAGGATGGAGATGAAGAG3’
3)CYP17MspA1I正向引物:5’CCCATACGAACCGAATAGA3’
CYP17MspA1I反向引物:5’AGTCAAGGTGAAGATCAGGGTAG3’
4)MDM2SNP309正向引物:5’CGGGAGTTCAGGGTAAAGGT3’
MDM2SNP309反向引物:5’AGCAAGTCGGTGCTTACCTG3’
5)NQ01C609T正向引物:5’TGGCACAGTTTCAAGGTTTATG3’
NQ01C609T反向引物:5’TATTCTCCAGGCGTTTCTTCC3’。
4.根据权利要求1或2所述的一种筛查子宫内膜癌易感基因的无创检测试剂盒,其特征在于:所含的五条DNA测序引物序列如下:
1)CYP1A1Msp I测序引物:5’GGGAGGAAGAAGAGGAGGTAG3’
2)CYP1B1Leu432Val测序引物:5’TTGTGCCTGTCACTATTCCTCA3’
3)CYP17MspA1I测序引物:5’CCCATACGAACCGAATAGA3’
4)MDM2SNP309测序引物:5’CGGGAGTTCAGGGTAAAGGT3’
5)NQ01C609T测序引物:5’TATTCTCCAGGCGTTTCTTCC3’。
5.根据权利要求1所述的一种筛查子宫内膜癌易感基因的无创检测试剂盒,其特征在于:试剂盒的组分和含量包括:
1)PCR反应体系:10×PCR反应缓冲液2.5ul,25mM dNTP混合液0.2ul,5U/ul Taq DNA聚合酶0.125ul,20uM特异性引物对,每条引物各0.25ul,ddH2O19.175ul;
2)PCR产物纯化体系:1U/ul SAP酶0.75ul,10U/ul ExoI酶0.375ul,ddH2O3.875ul;
3)测序反应体系:25%BigDye mix1ul,3.2uM DNA测序引物1ul,125mM EDTA溶液1ul,100%乙醇溶液15ul,70%乙醇溶液30ul,HIDI溶液8ul,ddH2O2ul;
本试剂盒供一人份检测应用,试剂盒的保存温度为-20℃。
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